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小鼠小腦顆粒細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:27:41瀏覽次數(shù):282

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 腦組織
小鼠小腦顆粒細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:原代CIK細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代肌腱細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代肌腱細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠小腦顆粒細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自小腦皮層組織;神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)與功能單位,小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元,直徑約10μm,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富,近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半。由于小腦神經(jīng)元的生長(zhǎng)、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似,而且數(shù)量多、便于取材,因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長(zhǎng)發(fā)育、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機(jī)制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段。小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元,在哺乳動(dòng)物的小腦內(nèi)數(shù)量為豐富。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯(lián)系,形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路,在小腦的神經(jīng)活動(dòng)中起著非常重要的作用。在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病中,病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元,導(dǎo)致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損,從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調(diào)。研究小腦顆粒神經(jīng)元在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病病理學(xué)變化中的反應(yīng)、病理發(fā)生的機(jī)理特別是分子機(jī)理,有賴(lài)于小腦顆粒神經(jīng)元細(xì)胞模型的建立。小腦顆粒細(xì)胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,正是這種排列保證了興奮的單向傳導(dǎo),這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設(shè),小腦顆粒細(xì)胞通過(guò)g-氨基丁suan接受戈?duì)柤?xì)胞的抑制性突觸的信息傳入。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白消化法結(jié)合神經(jīng)元專(zhuān)用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)NSE免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

異質(zhì)核糖核蛋白Q抗體 LARP4B蛋白封閉多肽 

Brachyury蛋白抗體 溶體相關(guān)膜蛋白1(CD107)封閉多肽 

LIMD2蛋白抗體 多巴胺受體D2封閉多肽 

乳腺癌膜相關(guān)蛋白101抗體 ARHGAP39蛋白封閉多肽 

磷化谷氨受體2B抗體 多藥耐藥相關(guān)蛋白9封閉多肽 

整合β1(CD29)抗體 白細(xì)胞介31封閉多肽 

英文名稱(chēng): N Cadherin 鋅指蛋白693封閉多肽 

2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框56抗體 絲氨脫水SDS封閉多肽 

patatin樣磷脂1抗體 CD34封閉多肽 

KBTBD13蛋白抗體 ERK2結(jié)合睪丸蛋白1封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 磷化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1封閉多肽 

EHD3蛋白抗體 MRVI1蛋白封閉多肽 

腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記相關(guān)蛋白質(zhì)7抗體 Membrin蛋白封閉多肽 

鈉離子通道相關(guān)蛋白1抗體 β晶體蛋白B1封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 核結(jié)構(gòu)蛋白5封閉多肽 

ERV31包膜蛋白抗體 形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子2封閉多肽 

40S核糖體蛋白S5抗體 酰基脫氫長(zhǎng)鏈封閉多肽 

凋亡抗體 過(guò)氧化4封閉多肽 
小鼠小腦顆粒細(xì)胞小鼠前列腺干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠前列腺干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠前列腺干細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠前列腺干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠前列腺干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

L Wnt-3A細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4L Wnt-3A細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持L Wnt-3A細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含L Wnt-3A細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于L Wnt-3A細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

U-87 MG細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4U-87 MG細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持U-87 MG細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含U-87 MG細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于U-87 MG細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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