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人胎盤羊膜細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:38:26瀏覽次數(shù):259

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 胎盤組織
人胎盤羊膜細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:青霉-鏈霉-兩性霉B溶液(100X) 細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100mLHEPES(1M)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100mL非必需氨基細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100mL鈉(100mM)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100mLL-細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100mL

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人胎盤羊膜細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胎盤組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細(xì)胞,包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì),其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成,均具有多分化潛能,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

線粒體核糖體蛋白L19抗體 酪蛋白激casein kinase Iα封閉多肽 

β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移6抗體 絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激3封閉多肽 

神經(jīng)元突觸膜結(jié)合蛋白2抗體 L3MBTL3蛋白封閉多肽 

二肽基肽8抗體 精子生成相關(guān)蛋白3封閉多肽 

GSK-3結(jié)合蛋白FRAT2抗體 熱休克蛋白-70封閉多肽 

表皮生長因子受體單克隆抗體 鋅指蛋白AN1-2B封閉多肽 

胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1抗體 鋅指蛋白99封閉多肽 

磷化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體 磷化δ連環(huán)蛋白封閉多肽 

英文名稱: Procalcitonin(PCT) 轉(zhuǎn)錄因子HNF-3α/FOXA1封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白S2抗體 19號(hào)染色體開放閱讀框48封閉多肽 

紅細(xì)胞膜蛋白STOM抗體 CD276封閉多肽 

英文名稱: BZO 微絲相關(guān)蛋白3封閉多肽 

口蹄疫病毒VP1抗體 泛蛋白連接G1封閉多肽 

溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1抗體 轉(zhuǎn)移生長因子β2封閉多肽 

磷化Ack1抗體 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷封閉多肽 

多能發(fā)育相關(guān)基因5抗體 抗菌蛋白DCD封閉多肽 

組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移JMJD1B抗體 嗜鉻粒A封閉多肽 

PRP18蛋白抗體 鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激磷封閉多肽 
人胎盤羊膜細(xì)胞NCI-H157細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H157細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持NCI-H157細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H157細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H157細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠輸尿管上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠輸尿管上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠輸尿管上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

GES-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4GES-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持GES-1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含GES-1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于GES-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

DMEM/F12(不含酚紅,含HEPES)500mL-

人支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人支氣管成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人支氣管成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人支氣管成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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