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兔尿道平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 08:40:57瀏覽次數(shù):228

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 尿道組織
兔尿道平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔結(jié)膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔牙周膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔尿道平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

尿道組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自尿道管組織;尿道是從膀胱通向體外的管道。起自膀胱的尿道內(nèi)口,止于尿道外口,行程中通過前列腺部、膜部和陰莖海綿體部,尿道在尿道膜部有一環(huán)橫行紋肌構(gòu)成的括約肌,稱為尿道外括約肌,由意識(shí)控制。尿道有三個(gè)解剖上的較狹部和膨大部,前者分別位于外口、膜部和內(nèi)口,后者位于舟狀窩、球部和前列腺部。尿道壁為粘膜層、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面,還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部),一部分為多列或復(fù)層柱狀上皮,在有尿道海綿體的一部分尿道,主要為復(fù)層柱狀上皮,在皺襞上也有單層柱狀上皮。特別在舟狀窩內(nèi)有許多環(huán)狀細(xì)胞,舟狀窩的遠(yuǎn)端部開始有未角化的復(fù)層鱗狀上皮。粘膜下層血液供應(yīng)豐富,主要為結(jié)締組織。肌肉層有縱行肌和外環(huán)形肌。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

微管蛋白δ1/δ Tubulin抗體 乙型肝炎病毒X蛋白 (HBX) 封閉多肽 

γ氨基丁受體相關(guān)蛋白樣3抗體 STRN4蛋白封閉多肽 

泛羧基末端水解5單克隆抗體 同源盒蛋白HOXC9封閉多肽 

磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體 NK細(xì)胞抑制性受體2DL2封閉多肽 

成熟T淋巴細(xì)胞增殖蛋白1抗體 轉(zhuǎn)錄因子同源框蛋白SIX2封閉多肽 

絲氨55抗體 HRAS樣抑制因子2封閉多肽 

10號(hào)染色體開放閱讀框30抗體 腫瘤抑制基因NME2封閉多肽 

晶狀體蛋白ζ抗體 溶體相關(guān)膜蛋白3封閉多肽 

磷羧化2抗體 細(xì)胞色P450ⅡJ2封閉多肽 

白介-1受體相關(guān)激2抗體 抗酒石性磷5型/5型性磷封閉多肽 

英文名稱: NGAL 20號(hào)染色體開放閱讀框118封閉多肽 

TOX3蛋白抗體 MOSPD3蛋白封閉多肽 

酪氨激受體C單克隆抗體 血影蛋白A鏈非紅細(xì)胞型封閉多肽 

5-羥色胺受體3抗體 磷化P27封閉多肽/周期依賴激抑制劑封閉多肽 

ZDBF2蛋白抗體 纖溶原激活物抑制劑1 RNA結(jié)合蛋白封閉多肽 

CpG結(jié)合蛋白抗體 原始廣泛存在蛋白1封閉多肽 

細(xì)胞分裂周期樣激3抗體 晶狀體蛋白λ封閉多肽 

CD79A抗體 細(xì)胞色B5還原樣蛋白封閉多肽 
兔尿道平滑肌細(xì)胞小鼠棕色脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠棕色脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠棕色脂肪干細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠棕色脂肪干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠棕色脂肪干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

8305C細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×48305C細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持8305C細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含8305C細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于8305C細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠外周血白細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠外周血白細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠外周血白細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

兔骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔骨骼肌細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔骨骼肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔骨骼肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

M199(含L-丙氨酰-L-)500mL-

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM (含L-丙氨酰-L-)500mL-

 


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