詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 登革熱病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
細(xì)胞色素P450家族成員26A1ELISA試劑盒 CYP26A1Mouse Phospholipidase A2, PL-A2 Elisa Kit
細(xì)胞色素P450家族成員21BELISA試劑盒 CYP21BMouse Aquaporin 5, AQP-5 Elisa Kit
細(xì)胞色素P450家族成員1B1ELISA試劑盒 CYP1B1Mouse Aquaporin 4, AQP-4 Elisa Kit
細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶ELISA試劑盒 CYP21BMouse Aquaporin 3, AQP-3 Elisa Kit
細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶ELISA試劑盒 CYP21AMouse Aquaporin 1, AQP-1 Elisa Kit
氧化酶亞基Ⅳ亞型1ELISA試劑盒 COX4I1Mouse Aquaporin 0, AQP-0 Elisa Kit
氧化酶Ⅵα亞基多肽1ELISA試劑盒 COX6A1Mouse Aquaporin 2, AQP-2 Elisa Kit
-1ELISA試劑盒 CYC1Mouse Thyroglobulin, TG Elisa Kit
1ELISA試劑盒 CYC1Mouse Inhibin, INH-A Elisa Kit
細(xì)胞色素bELISA試劑盒 COBMouse Chorionic Gonadotrophin β, β-CG Elisa Kit
細(xì)胞色素b561ELISA試劑盒 cytb561Mouse sex hormone-binding globulin, SHBG Elisa Kit
細(xì)胞色素b-561ELISA試劑盒 CYB561Mouse Dehydroepiandrosterone S7, DHEA-S7 Elisa Kit
細(xì)胞色素b-245β肽ELISA試劑盒 CYBβMouse Dehydroepiandrosterone, DHEA Elisa Kit
細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白ELISA試劑盒 CVLMouse High mobility group protein B1, HMGB-1 Elisa Kit
登革熱病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒酰基脫氫酶長鏈(ACADL)重組蛋白Recombina Acyl Coenzyme A Dehydrogenase, Long Chain (ACADL)
β-1,3-葡糖醛suan基移酶2(b3GAT2)重組蛋白Recombina Beta-1,3-Glucuronyltransferase 2 (b3GAT2)
氨基?;?/span>2(ACY2)重組蛋白Recombina Aminoacylase 2 (ACY2)
羧suan酯酶2(CES2)重組蛋白Recombina Carboxylesterase 2 (?