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人胃癌組織成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:26:27瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 胃癌組織
人胃癌組織成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SW579 [SW 579; SW-579] (人甲狀腺鱗癌細(xì)胞) (L15) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠氣管平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠毛囊細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶人支氣管成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶COS-7 (非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人胃癌組織成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胃癌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自患有胃癌病人的胃癌組織;胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,在我國各種惡性腫瘤中發(fā)病率居,胃癌可發(fā)生于胃的任何部位,其中半數(shù)以上發(fā)生于胃竇部,胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累,絕大多數(shù)胃癌屬于腺癌。在胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移的過程中,涉及諸多復(fù)雜的過程,如細(xì)胞外基質(zhì)的硬化和降解、新生血管的形成等,而這些過程會(huì)直接或間接的引起腫瘤微環(huán)境(Tumor mircoenvironment)的改變。腫瘤微環(huán)境即腫瘤細(xì)胞生存的外部環(huán)境,由不同種類的非腫瘤性的細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)構(gòu)成,包括纖維細(xì)胞,免疫細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞,間充質(zhì)干細(xì)胞等,腫瘤細(xì)胞通過調(diào)控這些間質(zhì)細(xì)胞,創(chuàng)造出有利于自身侵襲轉(zhuǎn)移的條件,從而使得腫瘤得到進(jìn)展。越來越多的證據(jù)表明,腫瘤微環(huán)境的改變在腫瘤進(jìn)展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環(huán)境中,研究多也是主要的間質(zhì)細(xì)胞是腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞演化而來。胃癌組織源成纖維細(xì)胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。剛分離的胃癌組織源成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合膠原消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

白細(xì)胞介36γ抗體 FRG2B蛋白封閉多肽 

慢性粒細(xì)胞白血病33抗體 磷化蛋白酪氨激JAK-2封閉多肽 

抑癌基因結(jié)合蛋白ARID1B抗體 重組人程序性死亡1(CD279)蛋白 

蝮蛇巴曲霉毒單克隆抗體 重組腺病毒早期E1A蛋白 

周期D結(jié)合蛋白1抗體 BCL2相互作用蛋白質(zhì)封閉多肽 

長壽相關(guān)基因lASS3抗體 重組人G-CSF (活性的, Tag free) 

內(nèi)皮1抗體 多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)蛋白2封閉多肽 

硫轉(zhuǎn)移ω1/glutathione S transferase Omega 1抗體 溶質(zhì)載體家族16成員12封閉多肽 

英文名稱: L-Citrulline 磷化蛋白激MST封閉多肽 

G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體 CD34封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM2抗體 磷化間變型淋巴瘤激封閉多肽 

英文名稱: COT 節(jié)律蛋白2封閉多肽 

5號(hào)染色體開放閱讀框20抗體 /2-(甲基氨基)-1-苯基-1--BSA偶聯(lián)物 

乳腺珠蛋白1抗體 磷脂蛋白受體Dab1封閉多肽 

磷化表皮生長因子受體抗體 磷化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1封閉多肽 

1號(hào)染色體開放閱讀框172抗體 磷化紅細(xì)胞生成受體封閉多肽 

HOOK2蛋白抗體 鈣粘附分子10封閉多肽 

英文名稱: phospho-Smad2 (Ser255) 鈣激活鉀通道蛋白 α 1封閉多肽 
人胃癌組織成纖維細(xì)胞大鼠皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠皮膚肥大細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠皮膚肥大細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠皮膚肥大細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

雞氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL雞氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持雞氣管上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞氣管上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞氣管上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SF126細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SF126細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SF126細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SF126細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SF126細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

RWPE-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4RWPE-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持RWPE-2細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含RWPE-2細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RWPE-2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

COLO 201細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4COLO 201細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持COLO 201細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含COLO 201細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于COLO 201細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠心肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠心肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠心肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠棕色脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠棕色脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠棕色脂肪干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠棕色脂肪干細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠棕色脂肪干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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