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小鼠表皮角質(zhì)形成細胞

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更新時間:2023-04-23 08:38:45瀏覽次數(shù):251

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 皮膚組織
小鼠表皮角質(zhì)形成細胞的相關產(chǎn)品:兔腦血管周細胞原代細胞5×105兔腦膜細胞原代細胞5×105兔腦皮層神經(jīng)元細胞原代細胞5×105兔海馬神經(jīng)元細胞原代細胞5×105兔脊髓神經(jīng)元細胞原代細胞5×105

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠表皮角質(zhì)形成細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細胞,此類細胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質(zhì)細胞中,細胞核與細胞器消失,細胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機體尚有保護作用,故不必在洗擦身體時用力搓擦,使其過早脫失。表皮角質(zhì)形成細胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細胞容易導致終末分化,不能充分增殖。角質(zhì)形成細胞終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,在其向角質(zhì)細胞演變過程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質(zhì)層下方還可見到透明層。

5.方法簡介:

實驗室分離的先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞分裂周期蛋白2亞型1抗體 淋巴細胞性白血病相關序列1封閉多肽 

英文名稱: ADK 半乳糖凝集2封閉多肽 

BMP內(nèi)皮細胞調(diào)節(jié)蛋白抗體 肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2封閉多肽 

附睪特異蛋白8抗體 蛋白質(zhì)磷1B封閉多肽 

泛樣蛋白SUMO2激活抗體 核仁蛋白10封閉多肽 

烯脂酰水解抗體 8號染色體開放閱讀框76封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框131抗體 有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2封閉多肽 

鋅指蛋白139抗體 纖維細胞生長因子結合蛋白2封閉多肽 

轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體 ATPH+轉(zhuǎn)運溶體輔助蛋白2封閉多肽 

嗅覺感受器蛋白10G9抗體 G蛋白信號調(diào)節(jié)因子14封閉多肽 

熱休克蛋白70蛋白2抗體 呼吸道合胞病毒核蛋白封閉多肽 

STR蛋白抗體 磷化熱休克蛋白90β封閉多肽 

磷化微管相關蛋白抗體 白細胞共同抗原封閉多肽 

卷曲螺旋結構域蛋白8抗體 THAP2蛋白封閉多肽 

造血轉(zhuǎn)錄因子PU.1抗體 DNAJB5蛋白封閉多肽 

FAM150A蛋白抗體 鋅指蛋白879封閉多肽 

防凍蛋白IV型 (Danio rerio) 抗體 ATP結合盒轉(zhuǎn)運家族蛋白11封閉多肽 

磷脂酰絲氨脫羧PISD抗體 氨基末端激3封閉多肽 
小鼠表皮角質(zhì)形成細胞HSC-T6細胞專用培養(yǎng)基125mL×4HSC-T6細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HSC-T6細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HSC-T6細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HSC-T6細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠羊膜上皮細胞培養(yǎng)基100mL小鼠羊膜上皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠羊膜上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠羊膜上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠羊膜上皮細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL小鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠結腸平滑肌細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠結腸平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠結腸平滑肌細胞的體外培養(yǎng)。

人滑膜細胞培養(yǎng)基100mL人滑膜細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人滑膜細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人滑膜細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人滑膜細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL大鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)培養(yǎng)基100mL小鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)的體外培養(yǎng)。

McCoy's 5A(不含酚紅)500mL-

 


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