詳細介紹
產(chǎn)品特點:
人肥胖易感基因825TPCR測定試劑盒規(guī)格PCR引物設(shè)計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板DNA序列。因此,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。
要設(shè)計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時應(yīng)預(yù)測將要擴增的片段單鏈是否形成二級結(jié)構(gòu)。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結(jié)構(gòu),就要避開它。如這一段不能形成二級結(jié)構(gòu),那就可以在這一區(qū)域設(shè)計引物。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計一對引物。一般引物長度為15-30堿基,擴增片段長度為100-600堿基對。
讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設(shè)計的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計引物。
同時引物之間也不能有互補性,一般一對引物間不應(yīng)多于4個連續(xù)堿基的互補。
引物確定以后,可以對引物進行必要的修飾,例如可以在引物的5′端加酶切位點序列;標記生物素、熒光素、等,這對擴增的特異性影響不大。但3′端不能進行任何修飾,因為引物的延伸是從3′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,因為密碼子第3位易發(fā)生簡并,會影響擴增的特異性與效率。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法)綜上所述我們可以歸納十條PCR
產(chǎn)品名稱 | 人肥胖易感基因825TPCR測定試劑盒規(guī)格 |
規(guī)格 | 50T |
價格 | 電詢 |
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技術(shù)概論:
人肥胖易感基因825TPCR測定試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點;能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。
引物的設(shè)計原則:
1、人肥胖易感基因825TPCR測定試劑盒規(guī)格引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計并具有特異性。
2、 產(chǎn)物不能形成二級結(jié)構(gòu)。
3、引物長度一般在15~30堿基之間。
4、G+C含量在40%~60%之間。
5、堿基要隨機分布。
6、引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補。
7、引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補。
8、引物5′端可以修飾。
9、引物3′端不可修飾。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位。
PCR引物設(shè)計的目的是找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板DNA序列。如前述,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對引物的設(shè)計不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,但遵循某些原則,則有助于引物的設(shè)計。
HUVEC-cpre-screened預(yù)選型正常人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)500,000cells大隱靜脈平滑肌細胞Manytypesofcells包裝:5×105次方(1ml)
原代骨細胞培養(yǎng)特制添加劑Manytypesofcells包裝:5/2.5/1ml
RK2OthersCanine狗kB/RK2人細胞裂解液(陽性對照)
Tul-1細胞,人肺癌細胞系大鼠肝上皮樣干細胞,WB-F344細胞T-101B胰蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
SK-MES-1(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞;CHO
IAA(Indole-3-AceticAcid)吲哚乙酸抗體/植物生長素抗體規(guī)格:0.2ml
IAA吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體規(guī)格:0.2ml
API5凋亡抑制因子5抗體規(guī)格:0.1ml
IASPP腫瘤細胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體規(guī)格:0.2ml
Iba1離子鈣接頭蛋白抗體規(guī)格:0.1ml
人肥胖易感基因825TPCR測定試劑盒規(guī)格Flupenthixoldihydrochloride鹽酸氟哌噻噸 規(guī)格:BentoneSD-2,適于中高極性溶劑
Teapolyphenol茶多酚;綠茶提取物 規(guī)格:BR
Tetrahydrocurcumin四氫姜黃素 規(guī)格:BR
TubulosideA管花苷A 規(guī)格:BR
2'-Acetylacteoside2’-乙?;锘ㄌ擒? 規(guī)格:BR
DexmedetomidineHCl鹽酸右美托咪定 規(guī)格:BR
Deflazacort地夫可特 規(guī)格:BR
D-(-)-PantolactoneD-(-)-泛酰內(nèi)酯 規(guī)格:BR
BuflomedilHCl鹽酸丁咯地爾 規(guī)格:BR
BuflomedilHCl鹽酸丁咯地爾 規(guī)格:BR
4-Androstene-3,17-dione雄烯二酮 規(guī)格:BR
4-Androstene-3,17-dione雄烯二酮 規(guī)格:BR
LucidenicacidA赤芝酸A 規(guī)格:BR
VitaminEsuccinate維生素E琥珀酸酯;D-α-生育酚琥珀酸酯 規(guī)格:BR
Ixabepilone(AzaepothiloneB;BMS247550)伊沙匹隆 規(guī)格:BR
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
人肥胖易感基因825TPCR測定試劑盒規(guī)格標準的PCR反應(yīng)體系
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul