詳細(xì)介紹
技術(shù)概論:
新城疫病毒RT-PCR檢測試劑盒規(guī)格聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點;能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。
產(chǎn)品名稱 | 新城疫病毒RT-PCR檢測試劑盒規(guī)格 |
規(guī)格 | 50T |
價格 | 電詢 |
PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
新城疫病毒RT-PCR檢測試劑盒規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
?
產(chǎn)品特點:
新城疫病毒RT-PCR檢測試劑盒規(guī)格PCR引物設(shè)計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴(kuò)增模板DNA序列。因此,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。
要設(shè)計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時應(yīng)預(yù)測將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥壗Y(jié)構(gòu)。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結(jié)構(gòu),就要避開它。如這一段不能形成二級結(jié)構(gòu),那就可以在這一區(qū)域設(shè)計引物。
現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計一對引物。一般引物長度為15-30堿基,擴(kuò)增片段長度為100-600堿基對。
讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機(jī)。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設(shè)計的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計引物。
同時引物之間也不能有互補性,一般一對引物間不應(yīng)多于4個連續(xù)堿基的互補。
引物確定以后,可以對引物進(jìn)行必要的修飾,例如可以在引物的5′端加酶切位點序列;標(biāo)記生物素、熒光素、等,這對擴(kuò)增的特異性影響不大。但3′端不能進(jìn)行任何修飾,因為引物的延伸是從3′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,因為密碼子第3位易發(fā)生簡并,會影響擴(kuò)增的特異性與效率。
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測試劑盒間序列(探針法)綜上所述我們可以歸納十條PCR引物的設(shè)計原則:
1、新城疫病毒RT-PCR檢測試劑盒規(guī)格引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計并具有特異性。
2、 產(chǎn)物不能形成二級結(jié)構(gòu)。
3、引物長度一般在15~30堿基之間。
4、G+C含量在40%~60%之間。
5、堿基要隨機(jī)分布。
6、引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補。
7、引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補。
8、引物5′端可以修飾。
9、引物3′端不可修飾。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位。
PCR引物設(shè)計的目的是找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴(kuò)增模板DNA序列。如前述,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對引物的設(shè)計不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功,但遵循某些原則,則有助于引物的設(shè)計。
人表皮黑色素細(xì)胞-中色素(HEM)(5×105)MN-c,小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元Mouse
CM-H011人肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
CD55OthersMouse小鼠CD55/DAF人細(xì)胞裂解液(陽性對照)
TT人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞TThumanthyroidductcarcinomacellsF-12K+10%FBS
IL21ProteinCanine重組狗IL21/Ierleukin21蛋白
胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解緩沖液)10mL
GDF-1生長、分化因子1抗體規(guī)格:0.2ml
GDF8/MSTN生長分化因子8抗體規(guī)格:0.2ml
GDF8羊抗生長分化因子8/肌肉抑制素抗體規(guī)格:0.2ml
GDF-9生長分化因子9抗體規(guī)格:0.2ml
GDNF膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體規(guī)格:0.1ml
新城疫病毒RT-PCR檢測試劑盒規(guī)格Limonin檸檬苦素,黃柏內(nèi)酯(橙皮提取) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Stearicacid硬脂酸(50%) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Stearicacid硬脂酸(98%) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Arctigenin牛蒡苷元 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Arctiin牛蒡子苷 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Swertiajaponin日當(dāng)藥黃素 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TaurocholicacidSodiumSalt牛磺膽酸鈉 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TaurocholicacidSodiumSalt?;悄懰徕c 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Nomilin諾米林 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LevistilideA歐當(dāng)歸內(nèi)酯A 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Imperatorin歐前胡素 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
α-pineneα-蒎烯 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
β-pineneβ-蒎烯 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
GypenosideXVII七葉膽苷XVII 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SodiumAescinate七葉皂苷鈉 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品