化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
中文名稱 | 阿菲波菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Afipia spp.PCR |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T |
保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品：
牛鼻炎病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Rhinitis Virus (BRV) RTPCR
牛輪狀病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Rotavirus（BRAV）RTPCR
牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV)RTPCR
牛病毒性腹瀉病毒型PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Viral Diarrhea Virus 2 (BVDV2)2RTPCR
豬痢疾短螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒Brachyspira hyodiseeriaePCR
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。 |
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Human tissue inhibitor of metal protease 1, TIMP-1 Elisa KitDendrin蛋白ELISA試劑盒 DDN免費(fèi)代測(cè)試劑
Human myelin basic protein autoaibody, MBP Elisa KitDerlin1蛋白ELISA試劑盒 DERL1免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Tissue Polypeptide Aigen, TPA Elisa KitDerlin2蛋白ELISA試劑盒 DERL2免費(fèi)代測(cè)試劑
human lung cancer Marker Elisa KitDerlin3蛋白ELISA試劑盒 DERL3免費(fèi)代測(cè)試劑
human gastric carcinoma Marker Elisa KitDermokine蛋白ELISA試劑盒 DMKN免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Squamous Cell Carcinoma Aigen 2, SCCAg 2 Elisa KitDesmuslin蛋白ELISA試劑盒 DMN免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 Elisa KitDiaphanous同源物1ELISA試劑盒 DIAPH1免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Gastroiestinalcancer Marker-CA199 Elisa KitDicer酶1ELISA試劑盒 DICER1免費(fèi)代測(cè)試劑
Human mammary carcinoma Marker-CA153 Elisa KitDickkopf 3ELISA試劑盒 DKK3免費(fèi)代測(cè)試劑
Human ovarian cancer marker-CA125 Elisa KitDickkopf相關(guān)蛋白2ELISA試劑盒 DKK2免費(fèi)代測(cè)試劑
Human Alpha-fetoprotein, AFP Elisa KitDiscs大同源物3ELISA試劑盒 DLG3免費(fèi)代測(cè)試劑
Human carcinoembryonic aign, CEA Elisa KitDiscs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5ELISA試劑盒 DLGAP5免費(fèi)代測(cè)試劑
阿菲波菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒總抗氧化能力（DPPH法）比色法檢測(cè)試劑盒氧化與抗氧化系列50管/48樣可見分光光度法
總抗氧化能力（ABTS法）比色法檢測(cè)試劑盒氧化與抗氧化系列100管/96樣微量法
總抗氧化能力（ABTS法）比色法檢測(cè)試劑盒氧化與抗氧化系列50管/48樣可見分光光度法
羥自由基清除能力比色法檢測(cè)試劑盒氧化與抗氧化系列100管/96樣微量法
羥自由基清除能力比色法檢測(cè)試劑盒氧化與抗氧化系列50管/48樣可見分光光度法
化工儀器網(wǎng)