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小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 16:39:39瀏覽次數(shù):191

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 肺動脈組織
小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠牙周膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠牙周膜干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺動脈組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持肺動脈的正常形態(tài);合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì);組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

白細(xì)胞介28A抗體 磷化核苷交換因子VAV3封閉多肽 

DNA聚合ι/DNA pol ι抗體 乳腺癌增強(qiáng)蛋白2封閉多肽 

Smad7單克隆抗體 磷化白介2受體β鏈封閉多肽 

信號傳導(dǎo)抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2抗體 鋅指蛋白238封閉多肽 

整合αL抗體 重組人心肌肌鈣蛋白I 

磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 鋅指蛋白14封閉多肽 

淋巴細(xì)胞特異性接頭蛋白抗體 磷化KB抑制蛋白激β封閉多肽 

結(jié)蛋白抗體 磷化轉(zhuǎn)錄因子3封閉多肽 

TNRC6C 周斑蛋白封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體81抗體 動力相關(guān)蛋白1封閉多肽 

磷脂酰基醇蛋白聚糖1抗體 驅(qū)動蛋白家族成員24封閉多肽 

鋅指蛋白423抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 

脫氫還原14抗體 抑癌基因p16封閉多肽 

褐黑相關(guān)蛋白ART抗體 重組豬藍(lán)耳病病毒N蛋白 

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白4抗體 細(xì)胞色b5還原3封閉多肽 

核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體 葡萄糖激封閉多肽 

核孔蛋白188抗體 蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ封閉多肽 

RYK單克隆抗體 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7封閉多肽 
小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠肌腱干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠肌腱干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠肌腱干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肌腱干細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肌腱干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠外周血淋巴細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠外周血淋巴細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠外周血淋巴細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠外周血淋巴細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠外周血淋巴細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠外周血淋巴細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

McCoy's 5A培養(yǎng)基(含HEPES、10%FBS)125mL×4McCoy's 5A培養(yǎng)基是Thomas McCoy等人在1959年設(shè)計的培養(yǎng)基,初專門用于Novikoff Hepatoma細(xì)胞的培養(yǎng)。McCoy's 5A培養(yǎng)基是改良的Basal Medium 5A,與其他培養(yǎng)基不同的是,McCoy's 5A含有還原型、細(xì)菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖。McCoy's 5A廣泛用于多種類型的原代細(xì)胞的培養(yǎng),如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網(wǎng)膜等。此外McCoy's 5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng)、細(xì)胞建系,以及一些淋巴細(xì)胞和較難培養(yǎng)的細(xì)胞的培養(yǎng)。

小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖(不含鈉)500mL-

 


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