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INS-1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

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更新時(shí)間:2023-04-27 08:24:57瀏覽次數(shù):379

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 125mL×4
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 產(chǎn)品濃度
INS-1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠脾淋巴細(xì)胞 人原代外根鞘細(xì)胞NB 4急性早幼粒細(xì)胞株 人原代外周血單個(gè)核細(xì)胞大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 人原代外周血間充質(zhì)干細(xì)胞BJ人皮膚成纖維細(xì)胞 人原代外周血巨噬細(xì)胞大鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞 人原代尾椎腫瘤細(xì)胞

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

產(chǎn)品形態(tài)

INS-1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

125mL×4

液體

商品詳細(xì)介紹:

由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持INS-1細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含INS-1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于INS-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品說(shuō)明

產(chǎn)品形態(tài):液體

產(chǎn)品濃度:1×

產(chǎn)品規(guī)格:125mL×4

培養(yǎng)基成分:RPMI-1640+10% FBS+50μmol/L β-mercaptoethanol+1% P/S

細(xì)菌檢測(cè):陰性

真菌檢測(cè):陰性

支原體檢測(cè):陰性

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn):細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常

內(nèi)毒素含量(EU/mL):≤3

儲(chǔ)存條件:2~8℃,避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸

有效期:3個(gè)月

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實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
公司產(chǎn)品僅用于科研

DSCR3 Antibody Blocking Peptide唐氏綜合征臨界區(qū)域蛋白3封閉多肽

DSCR4 Antibody Blocking Peptide唐氏綜合征臨界區(qū)域蛋白4封閉多肽

Dscam Antibody Blocking Peptide唐氏綜合征細(xì)胞粘附分子封閉多肽

DSCAML1 Antibody Blocking Peptide唐氏綜合癥細(xì)胞粘附分子2封閉多肽

BTBD10 Antibody Blocking Peptide糖代謝相關(guān)蛋白1封閉多肽

GPA33 Antibody Blocking Peptide糖蛋白33封閉多肽

GYPC Antibody Blocking Peptide糖蛋白C封閉多肽

MGAT5 Antibody Blocking Peptide糖蛋白GNTVA封閉多肽

Lrp2 Antibody Blocking Peptide糖蛋白gp330封閉多肽

RBMX Antibody Blocking Peptide糖蛋白P43封閉多肽

GP6 Antibody Blocking Peptide糖蛋白VI/六糖蛋白封閉多肽

HPX Antibody Blocking Peptide糖蛋白β-1B封閉多肽

Monkey Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit猴子小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒其它類(lèi)Elisa試劑盒48T

Monkey Vascular endothelial cell growth factor receptor,VEGFR-3/Flt-4 ELISA kit猴子內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒其它類(lèi)Elisa試劑盒48T

Monkey Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit猴子內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒其它類(lèi)Elisa試劑盒48T

Monkey sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA kit猴子性激結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒其它類(lèi)Elisa試劑盒48T
INS-1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基兔羊膜胚胎細(xì)胞 小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化

CHL (倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)(種屬鑒定正確) 小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化

CCD-18Co (人結(jié)腸組織細(xì)胞) 人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化

MM.1S (人IgA- 骨髓瘤細(xì)胞) 貓主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化

大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 雞腎小管上皮細(xì)胞永生化


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