相信許多實驗人員,都見過傳統(tǒng)的
單細(xì)胞分離設(shè)備,傳統(tǒng)的分離方法主要有:口吸管技術(shù)、顯微操作法、激光顯微切割法及流式細(xì)胞法。
操作者可以將組織內(nèi)單一細(xì)胞或細(xì)胞群切割下來進(jìn)行研究,避免間質(zhì)細(xì)胞及一些炎癥細(xì)胞造成背景“污染”,可以了解到細(xì)胞的位置信息。但該方法相鄰細(xì)胞容易污染,另外在組織固定及激光切割的過程中可能會破壞細(xì)胞的完整性,對細(xì)胞核酸損傷較大,從而影響后續(xù)的遺傳物質(zhì)的擴(kuò)增。
分離微流控技術(shù)
利用口吸管技術(shù),操作者可以在顯微鏡下選擇形態(tài)較好的細(xì)胞,對細(xì)胞幾乎無損傷,因此下游實驗的成功率高,但對操作人員的熟練度要求較高。
是指通過微米級別的流道精確操控微升、毫升級別樣品的技術(shù),目前主要有微反應(yīng)室、液滴技術(shù)。微流控技術(shù)在細(xì)胞分選應(yīng)用方面優(yōu)勢巨大,可利用重力離心、流體力學(xué)、電場力等來捕獲細(xì)胞,同時還可以將多種操作單元結(jié)合在一起,集細(xì)胞捕獲、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞裂解及后續(xù)的檢測分析于一體,實現(xiàn)高通量、自動化、集成化。
單細(xì)胞分離關(guān)鍵技術(shù):
單核液滴 (液滴只含一個細(xì)胞/菌/酶...刪除空液滴,去除雜質(zhì));
激光切換 (可選雙激光, 自由切換, 后續(xù)可靈活升級更換);
柔性篩選 (液滴高通量柔性篩選過程對細(xì)胞/菌活性影響很小);
耗材定制 (耗材按客戶不同應(yīng)用需求定制, 價格遠(yuǎn)低于進(jìn)口 );
檢測速度:300萬個液滴/8小時; 篩選速度:150萬個液滴/8小時)。