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主營產(chǎn)品： PEG衍生物，水凝膠，納米顆粒制備和合成服務(wù)，脂質(zhì)體和脂質(zhì)體用輔料，核酸遞送輔料，聚合物和共聚物，PROTAC / ADC Linker，多肽的定制服務(wù)，熒光染料，點擊化學(xué) |
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2020-3-23 閱讀(1365)
NGR多肽修飾的脂質(zhì)體的制備 NGR-PEG-DSPE
Jenny
廣州市碳水科技有限公司
一． NGR多肽修飾的脂質(zhì)體的制備
多肽修飾脂質(zhì)體的制備方法一般有2種：一種是將活化的DSPE-PEG-MAL（PEG修飾劑，常用的還有DSPE-PEG-NHS，DSPE-PEG-BTC）與成膜材料混合制備脂質(zhì)體，然后加入導(dǎo)向化合物與活化的MAL反應(yīng)，使之偶聯(lián)在脂質(zhì)體表面，另一種是先將多肽與活化的DSPE-PEG-MAL偶聯(lián)，然后將偶聯(lián)產(chǎn)物與脂質(zhì)體混合攪拌，靠DSPE端的疏水性相互作用使導(dǎo)向化合物連接到脂質(zhì)體表面[23]。FabioHSPC-CHOL-DSPE-PEG2000-DSPE-PEG2000-MAL 2∶1∶0.08∶0.02摩爾比的磷脂材料，混合溶于有機溶劑中，用氮氣吹干成膜，用25 mmol的HEPES和140 mmol的NaCl緩沖液水合（pH 7.4），制備得到空白脂質(zhì)體。用0.2～0.8 μm的聚碳酸酯膜擠出。再將NGR多肽與制備得到的脂質(zhì)體等摩爾混合，在4 ℃放置16 h，得到NGR靶向脂質(zhì)體。Chen等用EPC-CHOL-DSPE-PEG-DSPE-PEG-GGCNGRC 20∶10∶1∶1摩爾比的磷脂材料溶于CHCl3中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成膜，加入123 mmol的pH 5.4的硫酸銨溶液，水浴超聲30 min，所得到的脂質(zhì)體用80 nm的聚碳酸酯膜在50 ℃擠出11次，擠出后用葡聚糖凝膠柱純化脂質(zhì)體。有文獻報道[22]用第2種方法制備多肽修飾的脂質(zhì)體較好。優(yōu)點是防止制備脂質(zhì)體時超聲對多肽活性和活化的DSPE-PEG-MAL的破壞，提高了DSPE-PEG-MAL的利用率，保護了多肽的生物活性。
二、NGR多肽與DSPE-PEG2000的連接
NGR多肽修飾脂質(zhì)體的制備是先將NGR多肽與制備脂質(zhì)體所需的隱形材料DSPE-PEG連接，制備得到DSPE-PEG2000-NGR，再將其與磷脂材料按一定的比例混合，終制備得到NGR靶向脂質(zhì)體。因此，NGR多肽與DSPE-PEG2000連接的數(shù)量直接影響到脂質(zhì)體表面的NGR的密度，影響到脂質(zhì)體的腫瘤靶向性。研究表明，多肽與DSPE-PEG的連接是通過DSPE-PEG端活潑酯與多肽的α-氨基之間反應(yīng)進行的。常見的活潑酯類有-MAL，-NHS，-BTC等。DSPE-PEG-MAL與某種NGR多肽的化學(xué)反應(yīng)式見圖1。
碳水科技有限公司研發(fā)和生產(chǎn)脂質(zhì)體（DSPE）、二親共聚物膠束（PLA、PCL、PLGA）偶聯(lián)多種肽類產(chǎn)品，此產(chǎn)品應(yīng)用于藥物傳遞系統(tǒng)。我公司可定制合成的產(chǎn)品有：
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