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NCI-N87(人胃癌細(xì)胞)說明書	NCI-N87 (human gastric cancer cell line)	5×106cells/瓶×2

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NCI-N87(人胃癌細(xì)胞)說明書細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Raji(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格：500次

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺細(xì)胞

MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞gersion

H4(人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

胰酶細(xì)胞消液規(guī)格：100ml

HOS(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Hs 578T(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人腎層上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NCI-N87(人胃癌細(xì)胞)說明書6.25-400 ng/mL人B型慢性淋巴細(xì)胞白血病/淋巴瘤蛋白(BCL6B)ELISA試劑盒

6.25-400 ng/mLELISA Kit for Human B-cell CLL/lymphoma 6 member B protein

78-5000 pg/mL人重復(fù)序列包含蛋白2(BIRC2)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mLELISA Kit for Human Baculoviral IAP repeat-containing protein 2

7.8-500 ng/mL人β胡蘿卜素雙脫氧酶2(BCDO2)ELISA試劑盒

7.8-500 ng/mLELISA Kit for Human Beta, beta-carotene 9', 10'-oxygenase

0.156-10 ng/mL人雙糖鏈蛋白多糖(Biglycan)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Biglycan
NCI-N87(人胃癌細(xì)胞)說明書細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。