詳細(xì)介紹
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基品牌訂購流程:
根據(jù)自己需要向我司說明來意;
簽訂協(xié)議并支付貨款下單;
下單并包郵送貨上門;
產(chǎn)品名稱 | 人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基品牌 |
英文名稱 | Human intestinal vein endothelial cell culture medium |
規(guī)格 | 100mL |
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基品牌功能:
(1) 血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2) 表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3) 與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化:
(1) 主動脈硬化。
(2) 主動脈瘤
(3) 主動脈鈣化。
基本特性:
(1) 組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2) 鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3) 原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4) 每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5) 肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6) 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
10,000 U (provided with incubation buffer)DNase I recombinant, RNase-fre
150 U for up to 38 reactions of 50 µl final volume each containing 3.75 U enzyme blendExpand Long Templ.PCR Syst. ( 5 to 20 kb)
1.25 mlProteinase K,recomb.,PCR Grd.S
8 x 1.25 ml (for 400 reactions of 50 µl final reaction volume)FastStart PCR Master 10 ml
5,000 U (100 µl)ExpandTM Reverse Transcriptase
1 kit (40 labeling reactions)DIG DNA Labeling Kit
125 U for up to 125 reactions of 20 µl final volume each containing 1 U enzyme blendExpand High FidelityPLUS PCR System, dNTPack(up to 5 kb)
500 mgRNase, 500 mg
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基品牌放射形土壤桿菌 Agrobacterium radiobacter宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
串珠菌 Leuconostoc lactis根瘤菌 Rhizobium sp.
TBST人肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
人胚肺成纖維樣細(xì)胞人成骨肉瘤細(xì)胞
玉米桿菌 Lactobacillus zeae人破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基
GH3(大鼠垂體瘤細(xì)胞)根瘤菌
依維林鏈霉菌 Streptomyces iverini釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
香菇 Lentinula edodes根瘤菌 Rhizobium sp.
日本根霉 Rhizopus japonicus多孢木霉
Ishikawa, 人子宮內(nèi)膜細(xì)胞系野油菜黃單胞菌(甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌,野油菜桿菌) Xanthomonas campestris
曲霉屬 Aspergillus sp.人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
香菇 Lentinula edodesMDA-MB-468-06(人腺細(xì)胞)
柱黃曲霉 Aspergillus flavus var. column成人表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基品牌運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線