詳細介紹
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:6-磷酸葡萄糖(G6P)含量試劑盒(酶法)科研
規(guī)格:48樣 96樣
貨號:AS276
檢測方法:可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月。本產(chǎn)品僅用于科研實驗。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
RNF169 環(huán)指169抗體 規(guī)格: 0.2ml
TRIM31 環(huán)指HCG1抗體 規(guī)格: 0.2ml
APG4B/AUTL1 自噬相關(guān)4B抗體 規(guī)格: 0.2mlTUSC3 前列抑3抗體 規(guī)格: 0.2ml
GOT2 谷草轉(zhuǎn)氨2抗體 規(guī)格: 0.1ml
ILT2/CD85j 細胞表面免疫球樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM 兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 1mg
DRK1/Kv2.1 鉀通道DRK1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Thymosin Alpha-1/PTMA 胸肽α1抗體 規(guī)格: 0.1mlCripto 1 monoclonal (CT) 畸胎瘤衍化生因子單克隆抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml
CDK5RAP2 CDK5激活結(jié)合2抗體 規(guī)格: 0.2mlRibonuclease 6 核糖核6抗體 規(guī)格: 0.2ml
SHFM3 SHFM3抗體 規(guī)格: 0.2mlKCNG4/KV6.3 鉀離子通道G4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Defensin alpha 4 防御α4抗體 規(guī)格: 0.1ml
6-磷酸葡萄糖(G6P)含量試劑盒(酶法)科研1603-47-08-羥基佛手內(nèi)酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
104-55-2桂醛 規(guī)格: 20mg
30636-90-9原人參二 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
103-90-2對乙酰氨基 規(guī)格: HPLC≥99%;100mg
35790-95-5α-常春藤皂 規(guī)格: 20mg
1108-68-5華蟾它靈;Cibufotalin 規(guī)格: 20mg
590-46-5甜菜 規(guī)格: 20mg
石斛 規(guī)格: 約0.4mg/支
19121-58-5澳洲茄;Solasonine 規(guī)格: 20mg
860-79-7環(huán)維黃楊星 D 規(guī)格: ≥99%,20mg/vial
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。