詳細(xì)介紹
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱:葡萄糖氧化酶(GOD)活性測(cè)定試劑盒價(jià)格
規(guī)格:48樣 96樣
貨號(hào):AS228
檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:碳水化合物代謝系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
細(xì)胞EGFR 蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
細(xì)胞EGFR 蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
EGFR 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
EGFR 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
EGFR 蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次
細(xì)胞IGF 蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10/20次
載玻細(xì)胞IGF 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次
冰凍切組織IGF 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次
石蠟切組織IGF 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 10/20次
葡萄糖氧化酶(GOD)活性測(cè)定試劑盒價(jià)格539-86-6大蒜 規(guī)格: UV≥98%;20mg
正 規(guī)格: 50mg
52438-12-7異丁酰紫草;Isobutyrylshi 規(guī)格: 20mg
15345-89-8去甲氧基醉椒 規(guī)格: 10mg
鐵(Fer) 規(guī)格: 3支/套,0.5ml/支
;Digoxin 規(guī)格: 20mg
471-53-4甘草次 規(guī)格: 20mg
107-35-7?;?規(guī)格: 20mg
69091-17-4β-乙酰氧基異戊酰阿卡寧 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
529-53-3高黃芩 規(guī)格: 20mg
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。