產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱：ATP含量試劑盒(磷鉬酸比色法)科研

規(guī)格：24樣 48樣 48樣 96樣

貨號：AS262

檢測方法：可見分光光度法 可見分光光度法 微板法 微板法

產(chǎn)品分類：呼吸代謝途徑系列

貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。

細(xì)胞過氧化氫酶（CATALASE）催化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

血液過氧化氫酶（CATALASE）催化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

組織過氧化氫酶（CATALASE）催化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

細(xì)過氧化氫酶（CATALASE）催化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

植物過氧化氫酶（CATALASE）催化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

細(xì)胞過氧化氫酶（CATALASE）過氧化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

血液過氧化氫酶（CATALASE）過氧化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

組織過氧化氫酶（CATALASE）過氧化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

細(xì)過氧化氫酶（CATALASE）過氧化活性比色法定量檢測試劑盒  20次

ATP含量試劑盒(磷鉬酸比色法)科研體液尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑盒  20次

組織尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑盒  20次

胱蛋抑制劑（Cystatin C）定量檢測試劑盒  50次

糖化血紅蛋白（HbA1c）比色法定量檢測試劑盒  50次

糖化血清白蛋白（GSP）化學(xué)比色法定量檢測試劑盒  50次

糖化血清白蛋白（GSP）酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒  20次

糖血清蛋白（GSP）化學(xué)比色法定量檢測試劑盒  50次

糖血清蛋白（GSP）酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒  20次

總L-高半胱（Hcy）定量檢測試劑盒  50次

通用型高密度脂蛋白（HDL-Cholesterol）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒  20次

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。