化工儀器網
詳細介紹
本產品收到后按照上面指示溫度存放各成份，儲存18個月不影響使用效果。
產品介紹：
本試劑盒采用改進SDS-堿裂解法裂解細胞，離心吸附柱內的硅基質膜在高鹽、低pH值狀態(tài)下選擇性地結合溶液中的質粒DNA，再通過去蛋白液和漂洗液將雜質和其它細菌成分去除，最后低鹽、高pH值的洗脫緩沖液將純凈質粒DNA從硅基質膜上洗脫。
產品特點：
1.離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好?？朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。
2.有的去蛋白液配方，可以高效去除殘留的核酸酶，即使是核酸酶含量豐富的菌株也可以輕松去除。有效防止了質粒被核酸酶降解。
3.快速、方便，不需要使用有毒的氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。獲得的質粒產量高、純度好，可以直接用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。
PCR 反應需要使用哪些試劑和設備？
試劑:
模板DNA：PCR反應需要模板DNA，如從細胞、組織、血液中提取DNA等；引物：PCR反應的兩個引物，分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域，引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物；dNTPs：PCR反應中需要四種dNTPs，包括脫氧腺苷酸（dATP）、脫氧胸苷酸（dCTP）、脫氧鳥苷酸（dGTP）、脫氧胞嘧啶酸（dTTP），用于細胞分裂、DNA合成等生物學過程，用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增；Taq DNA聚合酶：PCR反應需要的聚合酶，一般使用Taq聚合酶，還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等，用于擴增DNA鏈；PCR buffer溶液：對PCR反應具有緩沖作用，調節(jié)反應pH，硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛，可增強PCR反應特異性，從而提高反應效率；酶切體系：PCR擴增往往涉及到重組、構建和測序等等實驗步驟，常常需要進行酶切操作。MARK:一種分子量標準，用來判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒：用于純化PCR反應產物；
設備：
PCR儀：用于控制反應溫度，保證PCR反應時不同溫度環(huán)節(jié)的嚴格控制；電泳槽：用于分離PCR擴增產物；核酸提取儀：從組織樣本中全自動提取核酸。 這些試劑和設備在PCR分子生物學技術中均是，只有在有序齊全的基礎上，才能進行PCR反應并得出準確結果。
公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
A-Hc2022 | 高純質粒小提中量快速提取試劑盒 | 50 次 |
PCR相關基礎實驗：
PCR反應基本步驟一般的聚合酶鏈式反應由20到35個循環(huán)組成，每個循環(huán)包括以下3個步驟：
一、變性：
利用高溫（93-98℃）使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個循環(huán)之前，通常加熱長一些時間以確保模板和引物分離，僅以單鏈形式存在。該步驟時間1-2分鐘，接下來PCR儀就控制溫度進入循環(huán)階段。
二、退火或稱接合,復性：
在DNA雙鏈分離后，降低溫度使得引物可以結合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點5℃。錯誤的退火溫度可能導致引物不與模板結合或者錯誤地結合。該步驟時間1-2分鐘。
三、延伸：
DNA聚合酶由降溫時結合上的引物開始沿著DNA鏈合成互補鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長度。傳統(tǒng)的Taq估計合成1000bp/min、較新的Tbr（來自于嗜熱菌Thermus brockianus）約40秒、商業(yè)公司生產的融合型聚合酶僅需約10-15秒。
公司正在出售的產品：
路鄧葡萄球菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 多巴胺脫羧酶ELISA試劑盒 DDC免費代測試劑 | 甲型流感（）病毒H1N1亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
丹參染料法PCR鑒定試劑盒 | 醛ELISA試劑盒 MGO免費代測試劑 | 單純皰疹病毒2型PCR檢測試劑盒說明書 |
水痘帶狀皰疹病毒PCR檢測試劑盒 | 補體因子H相關蛋白3ELISA試劑盒 | 納米小孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
哈維氏弧菌PCR檢測試劑盒 | 補體成分1rELISA試劑盒 | 木鼠布魯氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
鏈狀帶絳蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | 成神經細胞瘤抑制瘤變蛋白1ELISA試劑盒 | 幽門彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
犬輪狀病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 | 促甲狀腺素受體抗體ELISA試劑盒 | 玉米BT11/MS PCR檢測試劑盒 |
犬腺病毒PCR檢測試劑盒 | -25-羥化酶ELISA試劑盒 | 牛附紅細胞體（牛嗜血支原體）探針法熒光定量PCR試劑盒 |
鏈球菌B組探針法熒光定量PCR試劑盒 | 蛋白二硫化物異構酶A6ELISA試劑盒 | 馬冠狀病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
痢疾桿菌PCR檢測試劑盒 | 蛋白酶體亞基β6ELISA試劑盒 | 綿羊皰疹病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
犬巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒說明書 | 端粒保護蛋白1ELISA試劑盒 | 木賊鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
柯薩奇病毒 B5 型核酸檢測試劑盒 | 人核黃素激酶(RFK)試劑盒ELISA | 牛呼吸道合胞病毒PCR檢測試劑盒 |
禽副粘病毒2型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 人α1微球蛋白(α1-MG)elisa試劑盒 | 新兇手弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
節(jié)片代凡絳蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | 高純質粒小提中量快速提取試劑盒人鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA檢測試劑盒 | 展開青霉探針法熒光定量PCR試劑盒 |
七星庫道蟲PCR檢測試劑盒 | 人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA檢測試劑盒 | 犬輪狀病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒 | 人白介素7(IL-7)ELISA檢測試劑盒 | 牛呼吸道合胞病毒PCR檢測試劑盒 |
PCR反應條件優(yōu)化：
1、變性溫度和時間：
保證模板DNA解鏈是保證整個PCR擴增成功的關鍵。加熱90~95°C, 30~60s，再復雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過高或高溫持續(xù)時間過長，可對Taq酶活性和dNTP分子造成損害。
2、復性溫度和時間:
PCR擴增特異性取決于復性過程中引物與模板的結合。復性溫度越高，產物特異性越高。復性溫度越低，產物特異性越低。需根據引物的Tm值具體設定。
3、延伸溫度和時間:
一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個核苷酸時，過高的延伸溫度不利于引物與模板的結合，可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應時間，可根據待擴增片段的長度而定，小于1kb, 1min足夠；大于1kb需加長延伸時間。Taq酶可根據1kb/min增加時間。這里需要注意，延伸時間過長可能出現非特異擴增。因此需要設置恰到好處的延伸時間。
4、循環(huán)數:
其他參數選定后，PCR循環(huán)次數主要取決于模板DNA的濃度。理論上說20?25次循環(huán)后，PCR產物的積累即可達到最大值，實際操作中由于每步反應的產率不可能達到100%，因此不管模板濃度是多少，20~30次是比較合理的循環(huán)次數。循環(huán)次數越多，非特異擴增增加。
化工儀器網