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熒光PCR凍干之Tris

閱讀:2224      發(fā)布時間:2020-8-5
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Tris又叫三羥甲基氨基甲烷。是一種白色結(jié)晶或粉末, 溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、 苯, 是一種有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。其本身有很高的緩沖能力, 在水中溶解度高,對很多酶呈惰性反應(yīng), 它的這一特性使得 Tris 成為用于許多生化目的非常滿意的緩沖液。用于穩(wěn)定反應(yīng)體系的 pH,在 pH7.5-9.0 之間有較強(qiáng)的緩沖能力。其緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。其本身也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一。此外還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。熒光PCR凍干體系優(yōu)化方法:沒有經(jīng)驗(yàn)采用單一因素法,有一定經(jīng)驗(yàn)的采用多因素法。單一因素法篩選出保護(hù)效果比較好的保護(hù)劑,再將保護(hù)效果好的保護(hù)劑進(jìn)行組合,產(chǎn)生終配方。

Pilot7-12T應(yīng)用示例(熒光PCR凍干):

  1. 探針、底物、引物原料要求確定。
  2. 凍干溶液配方開發(fā),采用正交法或響應(yīng)曲面法進(jìn)行輔料篩選。
  3. 選擇適合的包材和模具。
  4. 設(shè)計凍干曲線配合輔料篩選。
  5. 確定配方及工藝。
  6. 穩(wěn)定性測試。
  7. 根據(jù)穩(wěn)定性測試結(jié)果修正工藝或配方。
  8. 整個環(huán)節(jié)注意環(huán)境、設(shè)備、人員的結(jié)合。

 

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