超微量分光光度計是現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器
閱讀:582 發(fā)布時間:2019-8-27
超微量分光光度計是一類很重要的分析儀器,無論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門,超微量分光光度計都有廣泛而重要的應(yīng)用。超微量分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。
超微量分光光度計目前成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)實驗室蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)等領(lǐng)域。應(yīng)用液體的表面張力特性,檢測時經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑,達(dá)到快速、微量、高濃度檢測吸光度的特點。
超微量分光光度計常用于定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的zui高吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。如:1OD的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。
超微量分光光度計與傳統(tǒng)分光光度計相比,優(yōu)點在于:
(1)所需樣品體積小,僅需1—2μl;
(2)不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品自動形成液柱,檢測完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可,避免了因為比色皿清洗不凈帶來的交叉污染;
(3)一般具有多個光程,而傳統(tǒng)分光光度計的光程為10mm,超微量分光光度計樣品無需稀釋,測量范圍可達(dá)到常規(guī)分光光度計的50倍;
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見),使用壽命更長;
(5)不需要預(yù)熱,可隨時檢測,檢測時間短;
(6)顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實驗室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計小很多。