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當(dāng)前位置:本生(天津)健康科技有限公司>>技術(shù)文章>>糖原磷酸化酶b(GPb)活性檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
糖原磷酸化酶b(GPb)活性檢測試劑盒
紅蛋白定性檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃
有效期:6個(gè)月
推薦:若使用96孔板測定,需使用96孔UV板
英文名稱:Glycogen Phosphorylase b (Gpb) Activity Assay Kit
別名:糖原磷酸化酶b試劑盒 GPb Kit 糖原磷酸化酶b(GPb)試劑盒 糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒
檢測方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
單位:盒
規(guī)格:100T/48S
實(shí)驗(yàn)原理:糖原磷酸化酶是糖原分解代謝中的關(guān)鍵酶,催化糖原的磷酸化反應(yīng)。該酶分為有活性的糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a, GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(Glycogen phosphorylase b, GPb)兩種形式。糖原的分解主要在糖原磷酸化酶a的催化下進(jìn)行。未添加激活劑時(shí),糖原磷酸化酶a催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映糖原磷酸化酶a活性。添加激活劑測定GP(GPa和GPb)總活性,未添加激活劑時(shí)測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
溶液的配制:
1、試劑二: 臨用前加入 0.5 mL 蒸館水,充分混勻;
2、試劑三:臨用前加入 0.5mL 蒸餡水,充分混勻,可分裝后-20°C保存 4周,避免反復(fù)凍融;2、
3、試劑四:臨用前加入 1.25 mL 蒸館水,充分混勻:可分裝后-20°C保存 4周,避免反復(fù)凍融
4、試劑五:臨用前每支加入1mL 蒸留水,充分混勻:可分裝后-20%C保存 4周,避免反復(fù)凍融:一支即可做 100T,為延長試劑盒使用時(shí)間故多給一支。
5、試劑六: 臨用前每支加入1m 蒸餾水,充分混勻:可分裝后-20C保存 4周,避免反復(fù)凍融:一支即可5做 100T,為延長試劑盒使用時(shí)間故多給一支。
6、試劑七:臨用前加入2mL 蒸餾水,充分混勻,可分裝后-20°C保存4周,避免反復(fù)凍融;
7、 工作液的配制:臨用前根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需用量,按照試劑一:試劑二: 試劑三: 試劑四 =148L:4L:4L:4uL,(1T 的量) 的比例,充分混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配.
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