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目錄:上海牧榮生物科技有限公司>>實驗試劑>>試劑盒>> 總巰基測試盒

總巰基測試盒
  • 總巰基測試盒
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更新時間:2024-05-07 13:44:12瀏覽次數(shù):375評價

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總巰基測試盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務。

總巰基測試盒

微量法100T/48S

注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

生物體內(nèi)巰基主要包括谷胱甘肽巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復氧化損傷的蛋白質(zhì),而且參與活性氧清除,后者對于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測定蛋白質(zhì)巰基含量。

測定原理:

巰基基團與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應,生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。

自備實驗用品:

天平、研缽、恒溫水浴鍋、酶標儀、96孔板、乙醇和蒸餾水。

試劑組成和配制: 

試劑一:液體18mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體1mL×1管,4℃避光保存。 

樣品的制備:

  1. 按照組織質(zhì)量(g):水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水)進行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

  2. 血清,培養(yǎng)液:稀釋5倍后測定,可取0.1mL樣本,加入0.4mL蒸餾水,混勻,置冰上待測。

操作步驟:

  1. 酶標儀預熱30min,調(diào)節(jié)波長至412nm。

  2. 操作表

在96孔板中加入如下試劑


對照管

測定管

樣品(μL)

40

40

試劑一(μL)

150

150

試劑二(μL)


10

乙醇(μL)

10


混勻,25℃靜置10min,測定412nm吸光值。ΔA=A測定-A對照。每個測定管設(shè)一個對照管。

計算公式:

總巰基標準曲線:y = 1.8111x - 0.0037,R2 = 1,x為標品濃度,單位μmol/mL,y為吸光度ΔA。

1. 組織:

(1)按樣本重量計算

總巰基含量(μmol/g 鮮重)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×V樣總÷W

=0.552×(ΔA+0.0037)÷W

 

(2)按樣本蛋白濃度計算

總巰基含量(μmol/mg prot)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×V樣總÷Cpr

=0.552×(ΔA+0.0037)÷Cpr

                                         

2. 血清、培養(yǎng)液:

總巰基含量(μmol/L)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×5×103

=2761×(ΔA+0.0037)

 

V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質(zhì)量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;5:血清,培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù);103 :1mmol/ L=103μmol/ L

注意事項

*低檢出限為10μmol/L。

上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

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  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式,為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源,加強網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運作效率,為客戶提供方便、快捷的服務。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價格。

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