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目的

美國藥典第<86>章允許使用非動物來源的試劑進行細菌內(nèi)毒素檢測，包括使用重組級聯(lián)試劑（rCR，Recombinant Cascade Reagent）和重組C因子試劑（rFC，Recombinant Factor C）。本文展示了Sievers Eclipse細菌內(nèi)毒素（BET，Bacterial Endotoxins Testing）檢測儀與rCR試劑在化驗各種藥品時的適用性和相容性，為鱟試劑（LAL，Limulus Amoebocyte Lysate）

細菌內(nèi)毒素檢測提供了高效、非動物來源的替代方法。

我們對7種已發(fā)布的市售產(chǎn)品進行了方法適用性和優(yōu)化分析。我們用Sievers Eclipse細菌內(nèi)毒素檢測儀運行了一個批次的市售PyroSmart NextGen重組級聯(lián)試劑（rCR），并對比Chromo-LAL動態(tài)顯色法鱟試劑。上述兩種試劑均由美國ACC公司（Associates of Cape Cod）生產(chǎn)。在本研究中測試的7種市售產(chǎn)品列于表1中。

背景信息

Sievers Eclipse BET檢測儀采用動態(tài)方法來分析標準曲線和最多21個帶陽性對照（PPC，Positive Product Controls）的樣品。Sievers Eclipse微孔板預(yù)置來自參考標準內(nèi)毒素（RSE，Reference Standard Endotoxin）的標準品和陽性對照（PPC），用戶僅需使用1mL的鱟試劑（LAL）即可運行每次最多5點的標準曲線（范圍：50–0.005 EU/mL）的化驗。

市售的rCR試劑與顯色法試劑類似，具有LAL級聯(lián)結(jié)構(gòu)。本研究旨在確定這種rCR試劑在進行現(xiàn)實生活樣品測試時的表現(xiàn)是否確實與傳統(tǒng)的動態(tài)顯色法鱟試劑相似。我們用Sievers Eclipse對每種產(chǎn)品分別使用rCR試劑和動態(tài)顯色法試劑進行測試。

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