NipponGenetics Bambanker無(wú)血清細(xì)胞凍存液
冷凍保存哺乳動(dòng)物細(xì)胞在生物學(xué)研究中非常有價(jià)值和普遍。為了防止技術(shù)原因(培養(yǎng)操作)使細(xì)胞污染或物理原因(培養(yǎng)箱故障)使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣。此外,長(zhǎng)期多次的培養(yǎng)和傳代,導(dǎo)致細(xì)胞在遺傳學(xué)性狀上的老化和分化都是促使在接收或生成新細(xì)胞系后首要考慮的適宜策略就是凍存細(xì)胞。低溫凍存對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于*停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0℃到-20℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。
如何減少或者避免冰晶形成,如同凍存細(xì)菌時(shí)用的甘油,DMSO(二甲基亞砜)是一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),減少冰晶的形成,減輕自由基對(duì)細(xì)胞損害,改變生物膜對(duì)電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。凍存液中加入后可以使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)的水分逐漸透出,從而減少了冰晶的形成,從而避免細(xì)胞的損傷。這就是為什么低溫凍存細(xì)胞時(shí)為什么要采用慢凍的一個(gè)重要原因。
一旦從生長(zhǎng)培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到冷凍培養(yǎng)基中,就要執(zhí)行慢凍的過(guò)程。盡管冷凍細(xì)胞系是通常執(zhí)行的程序,但是當(dāng)沒(méi)有合適的冷凍器具時(shí),或者由于存在血清,額外洗滌或操作不當(dāng)時(shí),就會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題。當(dāng)然,這個(gè)問(wèn)題是在細(xì)胞復(fù)蘇(快融)后才發(fā)現(xiàn)的。發(fā)現(xiàn)復(fù)蘇后的細(xì)胞大部分或者全部都是死細(xì)胞,甚至還有不容易發(fā)現(xiàn)的整個(gè)凍存過(guò)程的不當(dāng)導(dǎo)致的細(xì)胞分化。所有這些問(wèn)題和擔(dān)憂,都可以通過(guò)BambankerTM細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基試劑家族來(lái)解決。 BambankerTM*的成分允許直接將細(xì)胞在-80°C或液氮中冷凍保存,從而避免了對(duì)額外設(shè)備的需求,并且也避免了耗時(shí)且復(fù)雜的梯度逐漸冷凍方案。
產(chǎn)品特色
• 可在-80°C或-196°C的溫度下長(zhǎng)期凍存細(xì)胞
• 細(xì)胞復(fù)蘇后的活率高
• 即用型冷凍介質(zhì)–無(wú)需程序或順序降溫冷凍
• 無(wú)血清–無(wú)污染風(fēng)險(xiǎn)
• 可用于所有已知細(xì)胞系
• 保質(zhì)期長(zhǎng)
省時(shí)省事省力省細(xì)胞(Save time while saving your cells)
細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基BambankerTM允許在-80°C(或液氮)中冷凍保存細(xì)胞,從而避免了對(duì)額外的設(shè)備的需求,避免了耗時(shí)且復(fù)雜的受控冷凍方案。只需(1)離心收獲細(xì)胞,(2)抽吸走培養(yǎng)基,(3)細(xì)胞重懸浮在BambankerTM中(4)混勻轉(zhuǎn)移到冷凍管中(5)儲(chǔ)存在-80°C下。無(wú)需程序降溫或順序降溫! BambankerTM是一種無(wú)血清的冷凍保存介質(zhì),可以立即使用,并且可以在冰箱中保存長(zhǎng)達(dá)兩年。提供20毫升規(guī)格的包裝,使BambankerTM冷凍培養(yǎng)基非常適合實(shí)驗(yàn)室的各個(gè)成員獨(dú)立使用。如今,這種創(chuàng)新的細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基BambankerTM已成為日本市場(chǎng)的Leader,其特點(diǎn)是發(fā)表了許多篇文章,涉及*非常敏感的細(xì)胞系。
血清增加了長(zhǎng)期儲(chǔ)存的差異(Serum adds variation to long-term storage)
所有BambankerTM產(chǎn)品均不含血清。含有血清的冷凍保存培養(yǎng)基具有回收率波動(dòng)和成分不確定的缺點(diǎn)。凍存于含血清的培養(yǎng)基中的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性可能會(huì)受到批次之間血清差異的影響,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)和其他生物分子的組成和濃度會(huì)隨每批血清而變化。解凍和使用這種含血清培養(yǎng)基的細(xì)胞時(shí),可能會(huì)導(dǎo)致問(wèn)題。因?yàn)锽ambankerTM的每種成分都經(jīng)過(guò)仔細(xì)定義,因此您可以放心,在不同時(shí)間存儲(chǔ)的細(xì)胞都將有一致的效率。
BambankerTM可防止不期望的分化(BambankerTM prevents undesired differentiation)
不期望的細(xì)胞分化也可能是冷凍細(xì)胞長(zhǎng)期保存的一個(gè)問(wèn)題。 所有Bambanker試劑均旨在盡可能地減少此問(wèn)題。 對(duì)于特別麻煩的細(xì)胞,Bambanker不含DMSO的配方經(jīng)過(guò)特殊配制,可防止可能與含DMSO的冷凍保存試劑相關(guān)的問(wèn)題。 因此,請(qǐng)加入越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室的選擇,使用Bambanker保護(hù)其細(xì)胞系!
多能干細(xì)胞的細(xì)胞活力和ALP染色
上排:解凍兩天后檢測(cè)到大量細(xì)胞。 解凍后細(xì)胞沒(méi)有形態(tài)變化
下排:BambankerTM不會(huì)引起細(xì)胞分化,因?yàn)樗袃鼋Y(jié)的干細(xì)胞仍會(huì)產(chǎn)生高水平的堿性磷酸酶,這是多能干細(xì)胞的報(bào)告基因
NipponGenetics Bambanker無(wú)血清細(xì)胞凍存液家族(Family of BambankerTM)
◆操作流程
1)收集生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期*的細(xì)胞(5×105-1×107個(gè)細(xì)胞)
2)用1mL該細(xì)胞凍存液懸浮細(xì)胞,置于凍存管中,不需預(yù)冷,直接-80℃冷凍保存,也可在-80℃凍存12小時(shí)后可轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
3)用恒溫箱或者水浴鍋快速?gòu)?fù)蘇細(xì)胞
*冷凍細(xì)胞必須處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期