產(chǎn)品簡(jiǎn)介
量擴(kuò)增。
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:倍贊氏金蠅PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
英文名稱:Chrysomya bezzianaPCR
貨號(hào):YS30573-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí),可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長(zhǎng)期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí),切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Recombinant human CCL25 protein原裝、分裝乳脫酶
beta Galactosidase antibody原裝、分裝非凍型組織細(xì)胞RNA保存液(RNAwait)
Recombinant human LEC protein原裝、分裝SYBR Green II(10000×)
Recombinant human LEC protein原裝、分裝SYBR Green I(20×)定量PCR用
LEC antibody原裝、分裝,熒光素
Recombinant human HGF protein (Active)原裝、分裝蛋白酶抑制混合片
Recombinant human HGF protein (Active)原裝、分裝人白細(xì)胞介素-2
Recombinant human LTA protein原裝、分裝苯基磺酰氟
Recombinant human LTA protein原裝、分裝鈣蛋白酶HIV1 tat antibody [1]原裝、分裝四氯烯(光譜純,≥99%)
HIV1 tat antibody [N1]原裝、分裝二基砜(核磁共振定量標(biāo)準(zhǔn)品)
OPA1 antibody原裝、分裝鄰苯二鉀(核磁共振定量標(biāo)準(zhǔn),99.998%)
CBP80 antibody原裝、分裝1,2,4,5-四基苯(NMR定量標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC))
Human Cyclophilin A peptide原裝、分裝咖啡熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)品(+235 to +237℃)
Cyclophilin A antibody原裝、分裝1,3-二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)
UBR1 antibody原裝、分裝二化四基秋蘭姆(標(biāo)準(zhǔn)品)
SPIB antibody原裝、分裝正己標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:醇)
Olig2 antibody原裝、分裝順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯(標(biāo)準(zhǔn)品)
倍贊氏金蠅PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書CD44 antibody [MEM-263] (Allophycocyanin)原裝、分裝血紅素激肽1,大鼠,小鼠
Human Serum Albumin antibody [AL-01] (Biotin)原裝、分裝血啡肽-7
CD81 antibody [M38] (Phycoerythrin)原裝、分裝型肝炎病毒受體結(jié)合片段
EGFR (phospho Y992) antibody [EM-12]原裝、分裝型肝炎病毒C 非結(jié)構(gòu)蛋白3 蛋白酶抑制1
FAU / 40S ribosomal protein S30 antibody原裝、分裝型肝炎病毒前導(dǎo)S區(qū)(120-145)
Fibromodulin antibody原裝、分裝人類表皮生長(zhǎng)子受體-2/神經(jīng)膜(654-662)GP2
Ferritin Heavy Chain antibody原裝、分裝人類表皮生長(zhǎng)子受體-2/神經(jīng)膜(869-877)
GCLM antibody原裝、分裝孢疹病毒抑制1
CD105 antibody [MJ7/18]原裝、分裝6組氨
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。