五月婷网站,av先锋丝袜天堂,看全色黄大色大片免费久久怂,中国人免费观看的视频在线,亚洲国产日本,毛片96视频免费观看

目前研究人員越來越關(guān)注污染物作為導(dǎo)致癌癥的關(guān)鍵因素，除草劑已經(jīng)被報道，其可以通過修飾DNA的甲基化來改變?nèi)祟惢蚪M的表達。此外，草甘膦作為除草劑的一種，已被證實可以通過調(diào)控雌激素產(chǎn)生途徑來促進人乳腺腫瘤細胞的增殖。本篇應(yīng)用中使用法國Bertin公司的細胞智能成像系統(tǒng)InCellis研究了草甘膦對乳腺腫瘤細胞的影響。

本篇應(yīng)用主要比較使用草甘膦誘導(dǎo)的乳腺腫瘤原代細胞和乳腺癌細胞系的遷移實驗分析，其中Incellis細胞智能成像系統(tǒng)無需胰蛋白酶消化，無需標記即可完成遷移分析。

實驗材料

InCellis細胞智能成像系統(tǒng)（法國Bertin公司）；MCF-7、MDA-MB-231乳腺癌細胞系，草甘膦誘導(dǎo)的乳腺腫瘤原代細胞Glypho-iBPCTC；

實驗步驟

1.將3x105細胞接種到6孔板里，培養(yǎng)至融合度達到80%-90%，使用10μg/ml絲裂/霉素C（Sigma公司）處理2h（阻止細胞增殖）；

2.使用雙孔硅膠（Ibidi公司）插入到細胞進行細胞單層的劃痕處理；

3.使用InCellis來記錄細胞遷移的圖像，在不同的時間點（0、4、8、24、28、32、48h）對每個樣品進行拍照定量分析；

4.對于每個圖像，使用InCellis的軟件測量功能，對傷口的兩側(cè)進行距離的測定，沿著傷口進行10次記錄，細胞的平均遷移速度通過計算隨時間的推移，距離與時間的比值來獲得。

5.使用InCellis也可以在劃痕實驗中對圖像進行融合度的分析。

實驗結(jié)果

如圖1所示，MCF-7、MDA-MB-231和Glypho-iBPCTC三種細胞進行了劃痕實驗，左邊結(jié)果為0、8、32h捕獲的圖像；右邊結(jié)果為三種細胞的遷移速率（μm/h）；結(jié)果表明使用草甘膦誘導(dǎo)的乳腺腫瘤細胞的遷移速率理想。

圖2所示為Glypho-iBPCTC細胞在劃痕實驗之后的成像圖片，其中可以使用InCellis的細胞融合度計算功能，對細胞遷移的細胞計算融合度。

實驗結(jié)論

細胞劃痕實驗結(jié)果表明使用草甘膦誘導(dǎo)的乳腺腫瘤細胞比MCF-7、MDA-MB-231這兩種細胞系的遷移速率低，InCellis細胞智能成像系統(tǒng)可以輕松記錄細胞遷移，同時也可以在幾分鐘內(nèi)完成細胞融合度的計算。

使用InCellis，無需標記，無需侵入性的處理，直接可以直接在工作臺上進行圖像分析，是監(jiān)測原代細胞培養(yǎng)理想的工具。