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組蛋白提取試劑盒
  • 組蛋白提取試劑盒

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更新時(shí)間:2024-11-10 21:00:07

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本組蛋白提取試劑盒是由一套完整的優(yōu)化buffer和試劑組成,用于從哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織中提取總組蛋白(H2A、H2B、H3和H4),整個(gè)流程可在80min內(nèi)完成,且可保持組蛋白提取物中的翻譯后修飾(PTM)完整性,因此提取物可用于各種翻譯后修飾檢測(cè)及應(yīng)用,包括組蛋白甲基化、乙?;?、磷酸化、泛素化、SUMO化和ADP-核糖基化作用研究。

組蛋白提取試劑盒

Total Histone Extraction Kit

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

組蛋白提取試劑盒是由一套完整的優(yōu)化 buffer 和試劑組成,用于從哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織中提取總組蛋 白(H2A、H2B、H3 和 H4),整個(gè)流程可在 80min 內(nèi)完成,且可保持組蛋白提取物中的翻譯后修飾(PTM) 完整性,因此提取物可用于各種翻譯后修飾檢測(cè)及應(yīng)用,包括組蛋白甲基化、乙?;?、磷酸化、泛素化、 SUMO 化和 ADP-核糖基化作用研究。

包裝清單:

產(chǎn)品名稱50 次100 次儲(chǔ)存條件
Lysis Buffer 150ml100ml室溫
Lysis Buffer 210ml20ml室溫
Balance Buffer2ml4ml室溫
Adjust Buffer200μl300μl-20℃

產(chǎn)品特點(diǎn):

1.所提取組蛋白可保留所有相關(guān)翻譯后修飾,包括甲基化、乙?;?、磷酸化、泛素化、SUMO 化、 ADP-核糖基化以及 Neddylation 等。

2.建議每次從 10 8個(gè)細(xì)胞/0.1g 組織中提取組蛋白樣品。

3.整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程約需 80min。

4.無(wú)需超速離心。

操作步驟:

A:組織中提取

1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。

2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。

3.至步驟 2。

B:細(xì)胞中提取

1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。

2.至步驟 1。

步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。

步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。

步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。

步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。

步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。


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