AdvanceBio 氨基酸分析柱使用了 C18 硅膠顆粒填料，該填料經(jīng)過化學(xué)改性，具有高 pH 穩(wěn)定性。氨基酸分離在高 pH 條件下效率更高，并且這種改善相比于之前的氨基酸分析解決方案顯著延長了色譜柱在這些流動(dòng)相條件下的使用壽命。為了盡可能發(fā)揮這一改進(jìn)的優(yōu)點(diǎn)，注意切勿將色譜柱儲(chǔ)存在流動(dòng)相 A 中。短期儲(chǔ)存應(yīng)置于流動(dòng)相 B 中；長期儲(chǔ)存應(yīng)置于 100% 乙腈中。

Agilent AdvanceBio 氨基酸分析 (AAA) 全程解決方案將 Agilent InfinityLab 系列液相色譜儀和色譜柱技術(shù)的優(yōu)勢(shì)與成熟的柱前衍生化相結(jié)合，有助于優(yōu)化工作流程效率。它是 AdvanceBio 系列產(chǎn)品中的一員，旨在為蛋白質(zhì)、抗體、偶合物、新生物實(shí)體和生物藥物的完整表征提供一致、卓異的性能。

這一完善的單供應(yīng)商解決方案（包括化學(xué)品/標(biāo)準(zhǔn)品、色譜柱和應(yīng)用支持）可實(shí)現(xiàn)快速、靈敏的自動(dòng)化氨基酸分析。該方案是基于新的 InfinityLab 系列液相色譜儀和色譜柱技術(shù)。Agilent 1290/1260 Infinity II 樣品瓶進(jìn)樣器的自動(dòng)化在線衍生化省略了繁瑣的手動(dòng)操作流程，能夠提供可重現(xiàn)的反應(yīng)結(jié)果。AdvanceBio AAA 色譜柱的分析速度和分離度與亞 2 µm 色譜柱相當(dāng)，而反壓僅為亞 2 µm 色譜柱的 50%，并減少了色譜柱堵塞問題。

AdvanceBio AAA 溶液由用于氨基酸衍生化的經(jīng)過驗(yàn)證的鄰苯二甲醛/9-芴甲氧羰酰氯 (OPA/FMOC) 試劑發(fā)展而來。這些試劑與 AdvanceBio AAA 色譜柱和標(biāo)準(zhǔn)品結(jié)合，提供了一種兼具分析速度和靈敏度的理想氨基酸定量和定性分析方法。根據(jù)本文所述的方案使用時(shí)，AdvanceBio AAA 溶液能夠幫助用戶分離通常存在于蛋白質(zhì)/肽水解產(chǎn)物中的氨基酸。

AdvanceBio AAA 色譜柱基于安捷倫創(chuàng)新的 2.7 µm 表面多孔顆粒填料 (SPP) Poroshell 技術(shù)，這種顆粒填料由 1.7 µm 的實(shí)心核和 0.5 µm 的多孔殼層組成。

2.7 µm SPP 的柱效為亞 2 µm 全多孔顆粒填料的 80%–90%，而反壓比后者降低了 40%–50%。與全多孔顆粒填料相比，SPP 具有更窄的粒徑分布，這使柱床更均勻，并能減小色譜柱中的擴(kuò)散。同時(shí)，較薄的多孔殼層實(shí)現(xiàn)了較低的傳質(zhì)阻力。此外，由于色譜柱中含有一個(gè) 2 µm 篩板，因此它們的抗堵塞能力與 3.5 µm 和 5 µm 色譜柱相同。

直到目前，所有二氧化硅型 SPP 材料在 pH 較高的緩沖液（包括磷酸鹽緩沖液）中的壽命仍然有限。為獲得更長的壽命，必須對(duì)基礎(chǔ)顆粒填料進(jìn)行表面改性或特殊的鍵合改性。使用獨(dú)特工藝對(duì)表面進(jìn)行化學(xué)改性，形成一個(gè)有機(jī)層以避免硅膠在高 pH 條件下溶解。

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