超低背景的簡(jiǎn)單純化

Spot-Trap 是一種高質(zhì)量的 Spot- Trap與樹(shù)脂基質(zhì)偶聯(lián)的結(jié)合蛋白，設(shè)計(jì)用于免疫沉淀或親和純化方案。它只會(huì)

與 Spot-Tag 融合蛋白上發(fā)現(xiàn)的新的 12 個(gè)氨基酸序列相互作用。與其他短肽“標(biāo)簽"系統(tǒng)相比，Spot-Tag 具有許多優(yōu)勢(shì)。與所有 Nanobody-Trap 一樣，Spot-Trap 結(jié)合蛋白是一種小的 (14.7 kDa)、單價(jià)、高親和力單克隆羊駝抗體（“納米抗體"），并且可以很快識(shí)別 N表達(dá)的融合蛋白的-末端或C-末端。Spot-Trap 與瓊脂糖或磁性瓊脂糖珠的表面共價(jià)偶聯(lián)，可實(shí)現(xiàn)快速有效的免疫沉淀和親和純化。它針對(duì) Spot-Tagged 蛋白質(zhì)及其相互作用伙伴的生化分析進(jìn)行了優(yōu)化。它已經(jīng)過(guò)多種應(yīng)用測(cè)試，并在各種系統(tǒng)中有效工作，例如細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞系和昆蟲(chóng)細(xì)胞。對(duì)于包括質(zhì)譜法和酶活性測(cè)量在內(nèi)的生化分析，可以使用 Spot-Trap 通過(guò)免疫沉淀快速有效地分離 Spot-Tag 融合蛋白及其相互作用因子。

當(dāng)結(jié)果很重要時(shí)，使用 Spot-Trap

在左側(cè)，對(duì) Spot-Tagged GFP 進(jìn)行免疫沉淀。很明顯，Spot-Trap 不僅缺乏重鏈和輕鏈抗體污染，而且缺乏

污染蛋白的非特異性結(jié)合。這使得 Spot-Trap 成為一種出色的親和捕獲工具，用于單帶純化 Spot 標(biāo)記的蛋白質(zhì)

。在右側(cè)，相同的 Spot-Tagged GFP 與基質(zhì)結(jié)合，然后用 100 µM Spot-Peptide 競(jìng)爭(zhēng)性洗脫。這種溫和的親和純

化技術(shù)是保存蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能以及觀察更大蛋白質(zhì)復(fù)合物的好的方法。

Spot-Trap 專(zhuān)為一塵不染的背景而設(shè)計(jì)

在右側(cè)，使用不存在 Spot-Tag 或任何其他表達(dá)的標(biāo)記蛋白的 HEK293T 細(xì)胞裂解物進(jìn)行免疫沉淀（每個(gè)泳道都標(biāo)

準(zhǔn)化為相同的結(jié)合能力）。IP 是根據(jù)各自制造商的協(xié)議執(zhí)行的。兩種版本的 Spot-Trap 親和試劑幾乎沒(méi)有顯示出與

內(nèi)源性哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白的非特異性結(jié)合，因?yàn)樗捎昧私?jīng)過(guò)重新設(shè)計(jì)的優(yōu)質(zhì)洗滌緩沖液。這保證每次都有干凈的結(jié)果！

駱駝科單域抗體就像類(lèi)固醇上的 IgG

被稱(chēng)為駱駝科的動(dòng)物家族（駱駝、美洲駝和羊駝）產(chǎn)生沒(méi)有輕鏈的功能性抗體，即所謂的“重鏈"抗體。這些重鏈抗體通過(guò)單個(gè)可變結(jié)構(gòu)域識(shí)別并結(jié)合其抗原。當(dāng)從它們的羧基尾部切下時(shí)，這些桶狀結(jié)構(gòu) (2x3 nm) 非常小、天然存在且完整的抗原結(jié)合片段 (MW 為 13 kDa)。這些稱(chēng)為納米抗體的片段具有高特異性、低納摩爾范圍內(nèi)的親和力和亞納摩爾范圍內(nèi)的解離常數(shù)（通常比小鼠 IgG 好 10 到 100 倍）的特點(diǎn)。納米抗體的緊湊尺寸使其在高達(dá) 70°C 的溫度下極為穩(wěn)定，即使在 2M NaCl 或 0.5% SDS 中也能發(fā)揮作用。這些小而強(qiáng)大的抗體片段可用于各種*的應(yīng)用。他們將打開(kāi)您的研究可能性。