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液相色譜儀-液相色譜法測定淡水貝類中8種領(lǐng)苯二甲酸酯

 領(lǐng)苯二甲酸酯（PAEs），是環(huán)境激素類的一種，作為聚氯乙烯、纖維素樹脂、天然橡膠和合成橡膠的增塑劑廣泛應(yīng)用于塑料工業(yè)中，具有致畸、致突變、致癌以及生殖毒性。領(lǐng)苯二甲酸酯與塑料分子之間并不是以化學(xué)鍵結(jié)合，而是由氫鍵或范德華力連接，彼此保持各自獨(dú)立的化學(xué)性質(zhì)，因此它極易從塑料中釋放，從而轉(zhuǎn)入空氣、水體、底質(zhì)和生物等環(huán)境載體中，通過食物鏈危害著人體健康。
    領(lǐng)苯二甲酸酯類對水體的污染在國內(nèi)已有許多報(bào)道，其主要來源于生產(chǎn)和使用鄰苯二甲酸類的工廠所排放的工業(yè)污水。貝類屬于濾食性生物，移動(dòng)性相對較差，生活低于極為固定，所處環(huán)境受污染后，難免在濾食餌料時(shí)從水中吸入各種有害化學(xué)物質(zhì)，PAEs等有機(jī)物具有較強(qiáng)的親脂性，使其能在貝內(nèi)中進(jìn)行生物累積，并zui終經(jīng)食物鏈傳遞危害人類健康。因此建立一種、簡便、準(zhǔn)確的方法來檢測貝類肉中領(lǐng)苯二甲酸酯類，對于開展貝類生物體中PAEs安全評估具有重要的指導(dǎo)意義。
    目前，國內(nèi)外PAEs的分析方法主要有氣相色譜法、液相色譜法及色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，分析的樣品以環(huán)境、食品、塑料樣品為主，尚未見對淡水貝類的研究報(bào)道。本文選取液相色譜法測定淡水貝類中8種領(lǐng)苯二甲酸酯的方法，該方法簡便、快速，重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確度高，為淡水貝類中領(lǐng)苯二甲酸酯類物質(zhì)準(zhǔn)確的分析提供了理論參考。
    實(shí)驗(yàn)方法
    1.  樣品的處理  將購置好的新鮮貝類置于燒杯中，70度水浴加熱30min,將貝類除殼以外所有貝肉全部取出，加入適量的生理鹽水后，使用高速組織搗碎機(jī)，以10000r/min處理5min，然后移入50ml的離心管中，于4°C，15000r/min條件下離心15min，棄去上清液，將下層固體小燒杯中待用。
    稱取貝肉5g,置于50ml離心管中，加入25ml  1:1的正己烷和二氯甲烷混合液中，500W，53HZ超聲提取30min后，在4°C下以15000r/min轉(zhuǎn)速離心10min，移取上清液至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，濃縮液 移入2ml試管中，用甲醇定容到2ml，保存?zhèn)溆?。測定時(shí)，提取液需經(jīng)聚苯乙烯柱凈化和0.45ul有機(jī)濾膜過濾后供HPLC測定，每個(gè)樣品平行測定三次。
    2.   標(biāo)準(zhǔn)溶液配制   以甲醇為溶劑，配制濃度分別為0.1、0.5、1.5、10、25、50ul/ml的PAEs混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用外標(biāo)法計(jì)算樣品中PAEs的含量。
    3.   色譜條件    色譜柱：Agela   venusil  XBP-C18（250*4.6*5);流動(dòng)相為甲醇-水梯度洗脫，檢測器為紫外檢測器，檢測波長230nm，流速1.0ml/min，柱溫25°C,進(jìn)樣體機(jī)1ul.
    結(jié)論
    本文以正己烷和二氯甲烷為提取劑，液液萃取貝類中的8種PAEs，以甲醇-水為流動(dòng)相采用液相色譜儀建立了淡水貝類中領(lǐng)苯二甲酸酯類化合物的檢測方法。方法操作簡便，回收率高，重現(xiàn)性好。在實(shí)際樣品分析中，；螺螄，黃蜆和田螺中8種PAEs均有檢出。

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