轉(zhuǎn)染(transfection)指真核細胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標志的過程。DNA轉(zhuǎn)染技術的發(fā)展對現(xiàn)代分子生物學產(chǎn)生了巨大的影響?;蜣D(zhuǎn)染技術不僅是研究轉(zhuǎn)基因和基因表達的重要工具,而且是基因治療的關鍵步驟。理想的基因轉(zhuǎn)染試劑應該具有如下特點:高效轉(zhuǎn)染;安全;低細胞毒性;方法簡單;省時、經(jīng)濟。
人們一直在尋找更有效、毒性小同時對研究影響也小的轉(zhuǎn)染試劑。由于脂質(zhì)類轉(zhuǎn)染試劑對細胞的毒性是由其脂質(zhì)特性決定的,眾多的研究者和生物公司將新一代轉(zhuǎn)染試劑的開發(fā)聚焦在非脂質(zhì)體的聚合物上,并已有一些優(yōu)秀的試劑產(chǎn)品上市。
以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術正成為人們研究的方向。但應用的陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,仍然存在轉(zhuǎn)染效率不高和細胞毒性的問題。新的高分子聚合物轉(zhuǎn)染試劑是納米聚合物轉(zhuǎn)染試劑,由于采用新技術和新材料,具有高效、安全、低細胞毒性。其原理是:分子內(nèi)含有許多氨基,在生理PH下會發(fā)生質(zhì)子化,這些質(zhì)子化的氨基可以中和DNA質(zhì)粒表面的負電荷,使DNA分子由伸展結(jié)構壓縮為體積相對較小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。轉(zhuǎn)染復合物主要是通過細胞內(nèi)吞作用將DNA轉(zhuǎn)移進入細胞,形成內(nèi)含體(endosome),DNA從內(nèi)含體釋放,進入細胞質(zhì)中,再進一步進入核內(nèi)轉(zhuǎn)錄、表達。通過納米技術生產(chǎn)出的轉(zhuǎn)染試劑在納米尺度表現(xiàn)出結(jié)合保護DNA能力強、毒性低的*性能。
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