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DN25-10MG-Sigma脫氧核糖核酸酶
  • DN25-10MG-Sigma脫氧核糖核酸酶

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更新時(shí)間:2024-11-26 20:02:36

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Sigma脫氧核糖核酸酶是一種內(nèi)切核酸酶,可作用于與嘧啶相鄰的磷酸二酯鍵以產(chǎn)生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。我們的DNase I可將雙鏈和單鏈DNA酶解成寡核苷酸和單核苷酸。

Sigma脫氧核糖核酸酶

一般描述

Sigma脫氧核糖核酸酶是一種從牛胰腺分離的核酸內(nèi)切酶。
  • 我們的DNase I可將雙鏈和單鏈DNA酶解成寡核苷酸和單核苷酸。

  • 牛胰腺DNase存在四種異構(gòu)酶A, B, C和D,均具有不同的等電點(diǎn):5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式為A,其次為B和C,D所占的比例最小。

  • DNase I結(jié)構(gòu)類似于核酸外切酶III。其中包括兩個(gè)中央β折疊。每個(gè)β折疊由六個(gè)β-鏈組成。這種復(fù)雜的β折疊被大量環(huán)形和螺旋形區(qū)域包圍。該酶結(jié)構(gòu)類似于核酸外切酶III。[1]

應(yīng)用

  • 從原代細(xì)胞分離液中去除DNA,在降低粘度的同時(shí)提高產(chǎn)量:

  • 將標(biāo)記堿基摻入DNA:DNA缺口

  • 放射性標(biāo)記

  • 生物工藝應(yīng)用:DNA去除

  • 在RT-PCR前從RNA制劑中去除基因組DNA

  • 體外轉(zhuǎn)錄

  • 缺口平移

  • DNase足跡

  • 肌動蛋白調(diào)控胞內(nèi)肌動蛋白聚合和細(xì)胞凋亡

  • 蛋白質(zhì)與核酸紫外線交聯(lián)

  • DNase參與調(diào)控胞內(nèi)肌動蛋白聚合,同時(shí)參與細(xì)胞凋亡過程 [1]

用于從蛋白質(zhì)樣品中除去 DNA。

生化/生理作用

Sigma脫氧核糖核酸酶是一種內(nèi)切核酸酶,可作用于與嘧啶相鄰的磷酸二酯鍵以產(chǎn)生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。當(dāng)Mg2+存在時(shí),DNAse I可獨(dú)立切割DNA的每條鏈且切割位點(diǎn)是隨機(jī)的。當(dāng)Mn2+存在時(shí),兩條DNA鏈都幾乎是在同樣的位置被切割。二價(jià)陽離子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活劑。5 mM濃度的Ca2+可穩(wěn)定酶免收蛋白水解酶的消化。最適pH在7-8之間。來自牛胰腺的DNAse I由四種色譜可區(qū)分的組分A,B,C和D組成,它們的摩爾比分別為4:1:1。僅發(fā)現(xiàn)少量D。螯合劑、十二烷基硫酸鈉(SDS)和肌動蛋白都已知可抑制酶的活性。

特點(diǎn)和優(yōu)勢

我們的脫氧核糖核酸酶DNAse I基本屬于不含RNAse產(chǎn)品,支持該產(chǎn)品應(yīng)用。

單位定義

一Kunitz單位的酶在以I型或III型DNA作為底物時(shí),在 pH 5.0,37°C的條件下在每mL中每分鐘可引起0.001的A260改變。

外形

粗制品,含有氯化鈣

制備說明

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分裝保存在?20 °C一周后可能會丟失<10%的活性。同樣的溶液保存在2-8 °C則可能丟失約20%的活性。當(dāng)在pH 5和7之間時(shí),它可在60 °C維持活性最長達(dá)五小時(shí),并在68 °C <10分鐘內(nèi)丟失活性。它在乙酸緩沖液(pH 5.0)和tris緩沖液((pH 7.2),1 mg/mL濃度)中以6%/小時(shí)的速率丟失活性。

分析說明

通過縮二脲法測定的蛋白質(zhì)。




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