目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>ATCC細胞>>ATCC原裝細胞系>> YS1316C大鼠LSECs大鼠肝竇內(nèi)皮細胞ATCC
| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YS1316C | 主要用途 | 科研實驗 |
細胞名稱：大鼠LSECs大鼠肝竇內(nèi)皮細胞ATCC
細胞代次：P4
細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）
細胞凍存：無血清凍存液
細胞傳代：第一次建議1:2
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作，將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認收到狀態(tài)良好。（注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基，以便進行對比培養(yǎng)）
培養(yǎng)時的注意技巧
1.換液前將培養(yǎng)瓶豎在培養(yǎng)箱靜置1小時左右，輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基，然后加入3ml的新鮮培養(yǎng)基，混勻后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.如果細胞密度比較稀，培養(yǎng)基沒有明顯變化，可以加入500ul的FBS混勻后，豎著培養(yǎng)。
3.傳代時，先按照換液步驟處理，吸掉3ml左右培養(yǎng)基后，加入10ml的新鮮培養(yǎng)基，混勻后分2個T25培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。
4.培養(yǎng)一周左右可以離心一次，以去除一些死細胞。
5.該細胞比較脆弱，培養(yǎng)過程中不要頻繁拿出來觀察，以免影響細胞的生長。
6.該細胞的生長環(huán)境比較敏感，需使用較好的血清培養(yǎng)。
7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養(yǎng)。
訂購建議：
為避免收到細胞后離心處理，推薦使用15ml離心管發(fā)貨，到貨后直接分裝到2個T25培養(yǎng)瓶即可。
注意事項：有些細胞比較特殊，如貼壁不牢，在運輸過程中發(fā)生容易細胞脫落，這是正常現(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入消化液1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml培養(yǎng)基終止反應。再離心，棄上清，加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
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