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更新時(shí)間:2024-10-23 20:16:41瀏覽次數(shù):196評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
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貨號(hào) | YS1351C | 主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞名稱:KLN205小鼠肺鱗癌細(xì)胞ATCC
細(xì)胞代次:P4
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運(yùn)輸費(fèi))
細(xì)胞凍存:無血清凍存液
細(xì)胞傳代:第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時(shí)要將蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,以便進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng))
培養(yǎng)時(shí)的注意技巧
1.換液前將培養(yǎng)瓶豎在培養(yǎng)箱靜置1小時(shí)左右,輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基,然后加入3ml的新鮮培養(yǎng)基,混勻后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.如果細(xì)胞密度比較稀,培養(yǎng)基沒有明顯變化,可以加入500ul的FBS混勻后,豎著培養(yǎng)。
3.傳代時(shí),先按照換液步驟處理,吸掉3ml左右培養(yǎng)基后,加入10ml的新鮮培養(yǎng)基,混勻后分2個(gè)T25培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。
4.培養(yǎng)一周左右可以離心一次,以去除一些死細(xì)胞。
5.該細(xì)胞比較脆弱,培養(yǎng)過程中不要頻繁拿出來觀察,以免影響細(xì)胞的生長。
6.該細(xì)胞的生長環(huán)境比較敏感,需使用較好的血清培養(yǎng)。
7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養(yǎng)。
訂購建議:
為避免收到細(xì)胞后離心處理,推薦使用15ml離心管發(fā)貨,到貨后直接分裝到2個(gè)T25培養(yǎng)瓶即可。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞比較特殊,如貼壁不牢,在運(yùn)輸過程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對(duì)比培養(yǎng)),沉淀加入消化液1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
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