染菌載體的制備
1、載體根據(jù)消毒對象選擇相應的材料,如手術器械選擇不銹鋼片,物體表面選擇棉布片,非金屬管腔選擇聚四氟乙烯片(管),光滑表面可選擇玻璃片等。常用的材料有金屬、玻璃、濾紙、棉布、聚四氟乙烯等,金屬載體一般用 12mm 直徑圓形金屬片(厚 0.5mm),其他材質(zhì)載體一般為方形,大小 10mm×10mm,特殊試驗可使用其他材質(zhì)、形狀的載體。評價氣體、霧化等消毒方式時,不可使用布片和濾紙片等有吸附能力的載體。
2、所用載體(除濾紙片外)于染菌前,進行脫脂處理。脫脂方法如下:①將載體放在含堿性洗滌劑的水中煮沸 30min;②以自來水洗凈;③用蒸餾水煮沸 10min;④用蒸餾水漂洗至 pH 呈中性;⑤晾干、熨平備用。
3、布片用 40織紗的白平紋棉布制作。將脫脂后的布塊按載體規(guī)定的大小抽去邊緣一周的經(jīng)緯紗各一根,按抽紗痕剪開。金屬片以不銹鋼制作,紙片以濾紙制作。
4、 載體經(jīng)壓力蒸汽滅菌后,使用滴染法染菌。
5、 染菌用菌懸液:菌懸液和芽孢懸液的制備按上述6進行,然后加入等量 3.0% 或 0.3% 的牛血清白蛋白。
6、 滴染法染菌時,將經(jīng)滅菌的載體平鋪于無菌平皿內(nèi),用移液器逐個滴加菌液,必要時用接種環(huán)涂勻整個載體表面。置 36℃±1℃ 恒溫培養(yǎng)箱或者室溫干燥備用,黑曲霉菌染菌載體置于二級生物安全柜內(nèi)干燥備用。
7、 每個染菌載體的回收菌量為 1×106CFU/個~5×106CFU/個。特殊染菌載體(如壓力蒸汽滅菌生物指示物)的回收菌量符合相應標準的要求。
8、 染菌載體冷藏保存,芽孢載體有效期1個月,其他染菌載體當天使用。