雞卵泡顆粒細(xì)胞的保存方法
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
雞卵泡顆粒細(xì)胞分離自 PMSG 誘導(dǎo)后 3 天的雞卵巢組織,顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長(zhǎng)啟動(dòng)、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動(dòng)。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形。本公司生產(chǎn)的雞卵泡顆粒細(xì)胞采用機(jī)械分離法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為 5×105 個(gè)/瓶,細(xì)胞純度可達(dá) 80%以上,且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
一、使用方法
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代,建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))
1.取出細(xì)胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí),以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.細(xì)胞傳代:
1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細(xì)胞一次。
2)加入 0.125%胰蛋白酶消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,37℃消化 3min 左右;顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4)待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察,每隔 2-3 天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
二、注意事項(xiàng)
1.培養(yǎng)基于生化培養(yǎng)箱4℃條件下可保存 3-6 個(gè)月。
2.在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3.傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4.該細(xì)胞只可用于科研。