用電熱恒溫培養(yǎng)箱對(duì)志賀氏菌進(jìn)行操作
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基在微生物檢測中常用于用于志賀氏菌的選擇性分離和初步鑒別。
培養(yǎng)基原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;抑制劑抑制雜菌的生長;酚紅是pH指示劑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌呈黃色;混合色素對(duì)應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng),水解底物,釋放出顯色基團(tuán)。
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基配方(每升):
蛋白胨 9 g
酵母膏粉 3 g
氯化鈉 5 g
糖類 15 g
瓊脂 15 g
酚紅 0.1g
混合色素 2.1g
抑制劑 2 g
添加劑 10 g
終pH 6.8±0.2
使用方法:
1、稱取51.2 g志賀氏菌顯色培養(yǎng)基,加入970 mL蒸餾水或去離子水(可按比例擴(kuò)大增或縮小),攪拌加熱煮沸至*溶解(避免過度加熱),無需高壓滅菌,冷至50~55℃左右備用;
2、用30 mL蒸餾水或去離子水溶解1瓶添加劑(SR0440),充分混勻直至溶液變成淡黃色,使用0.45 μm或0.22 μm的濾膜過濾除菌,無菌操作加入到已冷卻至50~55℃的970 mL培養(yǎng)基基礎(chǔ)中(可按比例擴(kuò)大或縮小),充分混勻后傾注平板備用;
3、待檢樣品按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)(GB、SN、FDA等)進(jìn)行取樣及前增菌,挑取一環(huán)增菌液劃線接種于制備好的該培養(yǎng)基上,于電熱恒溫培養(yǎng)箱36±1℃培養(yǎng)20~24 h,觀察結(jié)果,挑取典型或可疑志賀氏菌單菌落進(jìn)行生化驗(yàn)證試驗(yàn)。
質(zhì)量控制:本品傾注平板后呈橙紅色,下列菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)20~24 h生長情況如下表:
培養(yǎng)基貯 存:貯存于2~8℃、避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。
規(guī) 格:可配置1000 mL的培養(yǎng)基干粉。