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煙粉虱寄生蜂寄主競爭實(shí)驗(yàn)

閱讀:956        發(fā)布時(shí)間:2021/7/13
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實(shí)驗(yàn)設(shè)備

 

溫室

養(yǎng)蟲籠(40 cm × 50 cm × 60 cm)

體視解剖鏡(Motic 140)

昆蟲針

塑料培養(yǎng)皿(直徑815 cm)

數(shù)碼相機(jī)

醫(yī)用注射器


實(shí)驗(yàn)材料

 

1. 供試植物:盆栽西紅柿

2. 供試?yán)ハx:B型煙粉虱,麗蚜小蜂,淺黃恩蚜小蜂


實(shí)驗(yàn)步驟

 

1. 供試?yán)ハx的培養(yǎng)

    (1) 煙粉虱經(jīng)室內(nèi)分子檢測確認(rèn)為B 型,室內(nèi)用西紅柿飼養(yǎng),將西紅柿苗(25 cm 高) 接煙粉虱24 h 后置于養(yǎng)蟲籠(40 cm × 50 cm × 60 cm) 內(nèi),待煙粉虱生長到一定時(shí)間后,取帶柄的葉片,用脫脂棉包裹葉柄基部,在體視解剖鏡下挑除不需要的若蟲,僅保留3齡末和4 齡初若蟲供試驗(yàn)用;

    (2) 麗蚜小蜂和淺黃恩蚜小蜂室內(nèi)用煙粉虱繁殖多代。蜂發(fā)育到黑蛹期時(shí)將其從葉片上用昆蟲針挑下放入鋪有濕潤濾紙的塑料培養(yǎng)皿(直徑815 cm) 內(nèi)備用。

2. 產(chǎn)卵器長度及卵大小的測量及待產(chǎn)卵量統(tǒng)計(jì)

    (1) 在內(nèi)置測微尺的體視解剖鏡下(Motic 140) 解剖羽化24 h 內(nèi)的雌蜂,測量雌蜂的產(chǎn)卵器及后足脛節(jié)長度,查數(shù)待產(chǎn)卵數(shù)量并測量卵尺寸(長×寬) ;

    (2) 將羽化后的雌蜂引入(淺黃恩蚜小蜂引入雌雄蜂) 塑料培養(yǎng)皿內(nèi),供以5 %蜂蜜水,同時(shí)內(nèi)置葉柄包裹有濕潤棉球的西紅柿葉片,25 ℃下至第5 天解剖檢查雌蜂體內(nèi)的待產(chǎn)卵量。根據(jù)羽化蜂的多少,每批解剖5~20 頭,解剖3 批。

3. 產(chǎn)卵行為的觀察

    (1) 在Motic 解剖鏡下觀察蜂的產(chǎn)卵行為并記時(shí),寄生蜂觸角接觸到煙粉虱若蟲開始,到檢測完成調(diào)轉(zhuǎn)身體準(zhǔn)備將產(chǎn)卵器插入寄主體內(nèi)的時(shí)間記為寄主檢測時(shí)間;

    (2) 記錄寄生蜂檢測過程中的行為,以檢測圈數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),產(chǎn)卵器插入到拔出的時(shí)間記為產(chǎn)卵時(shí)間。

4. 發(fā)育歷期的比較

    (1) 取干凈無蟲的西紅柿苗放置于飼養(yǎng)煙粉虱的環(huán)境中,12 h 后取出,吹干凈上面的煙粉虱成蟲后將苗置于無蟲的養(yǎng)蟲籠內(nèi)室溫條件下飼養(yǎng),濕度70 %左右;

    (2) 待煙粉虱若蟲發(fā)育至3 齡后取葉片,保持葉片有4 齡初若蟲蟲量大約20 頭,挑除其余若蟲,用數(shù)碼相機(jī)拍照后打印出來供標(biāo)記用,然后將葉柄基部用脫脂棉包裹,用醫(yī)用注射器吸取一定的水注入脫脂棉中;

    (3) 將葉片放入培養(yǎng)皿內(nèi)(直徑: 815 cm) 引入一頭雌蜂(淺黃恩蚜小蜂為交配過的雌蜂,交配過的雌蜂會(huì)直接產(chǎn)卵在煙粉虱體內(nèi),而未交配過的雌蜂不會(huì)在煙粉虱體內(nèi)產(chǎn)卵) ,觀察其產(chǎn)卵行為,標(biāo)記產(chǎn)卵寄生的寄主;

    (4) 每12 h 解剖無法從煙粉虱背部看到孵化的寄生蜂幼蟲或卵的煙粉虱若蟲10 頭,觀察寄生蜂的發(fā)育進(jìn)度,對可以從背部觀察到的,則直接記錄。寄生蜂化蛹后每12 h 觀察一次記錄化蛹時(shí)間,最后統(tǒng)計(jì)羽化蜂的數(shù)量。每種蜂接蜂15 頭,觀察所有被寄生粉虱體內(nèi)蜂的發(fā)育。

5. 兩種蜂間的寄主競爭

    (1) 根據(jù)羽化雌蜂的待產(chǎn)卵量,每處理提供4 齡初煙粉虱若蟲10 頭(一張番茄葉片上) ,引入麗蚜小蜂和淺黃恩蚜小蜂雌蜂各一頭,記為Ef Es 處理,同時(shí)設(shè)引入兩頭麗蚜小蜂(記為Ef Ef 處理) 或淺黃恩蚜小蜂(記為Es Es 處理) 為對照,放入光照培養(yǎng)箱中, 24 h 后去除蚜小蜂,解剖所有煙粉虱若蟲,每處理重復(fù)25 次,分別記錄每頭寄主體內(nèi)麗蚜小蜂和淺黃恩蚜小蜂的卵量。若某重復(fù)內(nèi)供試煙粉虱被取食數(shù)量超過60 % ,則統(tǒng)計(jì)分析時(shí)剔除該重復(fù)。

6. 數(shù)據(jù)分析

    (1) 利用SAS910 對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析比較。兩種蜂生物學(xué)特性數(shù)據(jù)的比較等用測驗(yàn)進(jìn)行分析,競爭結(jié)果的數(shù)據(jù)分析中,若是兩組數(shù)據(jù),則采用測驗(yàn)進(jìn)行分析比較; 對兩組以上采用ANOVA 進(jìn)行方差分析,然后采用Tukey’s HSD test 進(jìn)行平均數(shù)之間的比較。


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