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　　在戴安液相色譜分析中，當(dāng)色譜柱的選擇確定后，應(yīng)采用適合組成的流動(dòng)相進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)過程準(zhǔn)確控制流動(dòng)相的流量，防止微米數(shù)量級(jí)機(jī)械雜質(zhì)阻塞流路，保持較低的柱壓力降是實(shí)驗(yàn)操作中的關(guān)鍵。為此，色譜工作者應(yīng)當(dāng)掌握以下的實(shí)驗(yàn)技術(shù)： 溶劑的純化技術(shù)。

　　在液相色譜分析中，正相色譜以己烷作為流動(dòng)相主體，二氯甲烷、氯仿、乙醚作為改性劑；反相色譜以水作為流動(dòng)相主體，以甲醇、乙腈、四氫呋喃作為改性劑。通常使用分析純、優(yōu)級(jí)純試劑，可以滿足液相色譜分析的要求，但為了防止微粒雜質(zhì)堵塞流路或柱入口墊片，流動(dòng)相都需要用G4微孔玻璃漏斗過濾，戴安液相色譜或用0.45μm的微孔濾膜過濾后再使用。

　　色譜柱的填充技術(shù)

　　填充色譜柱的方法，根據(jù)固定相微粒的大小有干法和濕法兩種。微粒大于20μm的可用干法填充，要邊填充邊敲打和振動(dòng)，要填得均勻扎實(shí)。直徑10μm以下的柱，不能用干法填充，必須采用濕法。

　　色譜柱的保護(hù)與再生技術(shù)

　　液相色譜柱填充了全多孔球形微粒固定相，并用高壓勻漿法填充，其售價(jià)較貴，若使用不當(dāng)，會(huì)出現(xiàn)柱理論塔板數(shù)下降、色譜峰形變壞、柱壓力降增大、保留時(shí)間改變等不良現(xiàn)象，從而大大縮短色譜柱的使用壽命。

　　梯度洗脫技術(shù)

　　在HPLC分析中，梯度洗脫功能相似于氣相色譜分析中的程序升溫，它對(duì)改善色譜分離效果，增加峰容量，可發(fā)揮重要的作用。

　　戴安液相色譜色譜柱前和柱后的衍生化檢測技術(shù)

　　當(dāng)前在液相色譜法，zui常用的高靈敏度檢測器是熒光檢測器和紫外檢測器，但它們只能檢測有紫外吸收或在紫外光照射下產(chǎn)生熒光的、具有特定化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物。

　　為了使在這些檢測器上響應(yīng)值很小的化合物也能被檢測出來，通過與衍生化試劑反應(yīng)，使胺、氨基酸、羧酸、醇、醛、酮等有機(jī)物生成可吸收紫外光或產(chǎn)生熒光的化合物。

　　樣品的預(yù)處理技術(shù)

　　對(duì)組成復(fù)雜的樣品或受外界條件（日光照射、受熱、電磁輻射、氧化等）作用而發(fā)生變化的不穩(wěn)定樣品，都需經(jīng)過預(yù)處理才能進(jìn)行色譜分析。

　　戴安液相色譜掌握上述各種技術(shù)，就可更自主的開展工作，并為進(jìn)一步從事微柱液相色譜分析或二維液相色譜分析創(chuàng)造良好的前提工作條件。