生物制藥微課堂｜宿主細胞殘留蛋白分析，如何獲得更佳結果？
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LCMS分析方法越來越多的用于宿主細胞殘留蛋白（HCP）的分析，HCP分析的難點見往期微信稿“生物制藥微課堂|第二期-宿主細胞殘留蛋白如何分析？”。如何獲得優(yōu)秀的基于LC-MS的HCP分析結果? 答案將在本期分享的兩場關于HCP的LCMS分析的網絡講座，每場都有詳細的樣品前處理，LCMS方法和數據處理的詳細介紹，可謂干貨滿滿，供有需求的老師參考。
Webinar 1:
Data Visualizations for Routine Host Cell Protein Analysis by LCMS
講師介紹
博士：
Andrew Williamson
賽默飛生物制藥銷售專家
Andrew Williamson博士是賽默飛生物制藥銷售專家。在此之前，Andrew在賽默飛公司擔任蛋白質組學專家，此前他在曼徹斯特大學克里斯蒂醫(yī)院的蛋白質組學實驗室工作并管理該實驗室。在此期間，安德魯從事了許多基于腫瘤項目的蛋白質組學分析，研究zhi療的關鍵指標和生物標志物的發(fā)現。在此期間，Andrew還與合作者合作分析了多種干細胞和癌癥樣本，包括小鼠、人和誘導多能干細胞。
講師介紹
博士：
Michelle English
Protein Metrics Inc.
的成功科學家
Michelle English 博士是Protein Metrics Inc.的客戶成功科學家，在該公司，她專注于幫助客戶使用質譜對早期和后期產品表征。在加入Protein Metrics公司之前，Michelle是輝瑞公司的一名科學家，并在弗吉尼亞大學的Hunt實驗室工作。
看點：
HCP的完整解決方案及可視化的數據展示
生物藥生產過程中會產生產品不需要的宿主細胞殘留蛋白(HCP)，大部分HCP可以通過純化去除。監(jiān)管指南規(guī)定在上市前必須確定生物藥中殘留的HCP水平。LC-MS技術在過去幾年中得到了快速發(fā)展，但迄今為止該技術對分析人員專業(yè)技能要求高和需要對數據進行手工分析。分析挑戰(zhàn)包括樣品寬動態(tài)范圍，極低的HCP豐度，差的序列覆蓋率，等等。此外，假陽性和假陰性一樣危險，會造成不能重現，這也阻礙了LC-MS成為常規(guī)的HCP分析手段。
講座關鍵點：
01.為什么LC-MS在生物藥分析中越來越常用
02.如何對非質譜專家用戶有效的展示數據
03.如何更快提供可信的結果
該報告詳細介紹了樣品前處理方法、LC-MS方法和數據處理。非變性SMART Digest酶解能去除大部分主成分，提高HCP鑒定的數目。高靈敏度和采集速度快的Orbitrap Exploris 480 質譜儀進一步提高HCP鑒定數目，并且重現性好。軟件Proteome Discoverer和Protein metrics用于數據的分析，得到可視化好的HCP鑒定和相對定量的結果和報告。
流程化的數據處理
（點擊查看大圖）
Webinar 2:
A Data-Independent Acquisition (DIA) library based approach for Host cell protein analysis on the Thermo Scientific Orbitrap platform
講師介紹
博士：
Ian Anderson
賽默飛生物制藥銷售專家
Ian Anderson博士在Allergan工作了6年多，專注于從抗體到基因zhi療載體等多種生物制藥產品的質譜鑒定。在此之前，他在SGS-M-Scan工作，開發(fā)用于表征生物藥品和生物仿制藥的新型質譜方法。
看點：
基于DIA采集模式的HCP分析
現在用于HCP分析方法，絕大部分用的是數據依賴性采集（DDA）的方法。數據非依賴性采集（DIA）與DDA相比，不丟失任何信息、靈敏度更高，適合用于HCP分析。該報告講解了基于Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos三合一質譜儀和Orbitrap Exploris 480質譜儀開發(fā)HCP的DIA方法，以及如何在兩個質譜系統(tǒng)設置合適參數。該報告將詳細介紹好的HCP數據庫如何建立以及構建該庫的zui佳方式，并列舉了如何在生物制藥過程開發(fā)中使用該方法的例子。
講座關鍵點：
01.討論基于高分辨質譜平臺的HCP分析方法
02.演示使用DIA方法進行HCP的分析
03.該方法在生物制藥開發(fā)過程中應用
DIA分析LCMS平臺
本報告詳細介紹了DIA采集模式用于HCP分析的方法建立。DDA是好的建立譜圖庫的數據采集模式，數據不丟失、高靈敏度的DIA采集的數據可以檢索該譜圖庫從而得到可信的HCP鑒定結果。本報告對DDA和DIA的質譜參數設置進行了詳細的解讀，且該方法可以在Orbitrap Fusion Lumos三合一質譜儀和Orbitrap Exploris 480質譜儀相互轉移，表明該方法的穩(wěn)健性好、重復性好。
DIA 用于HCP分析的實驗流程
（點擊查看大圖）
使用Orbitrap高分辨質譜平臺Exploris 480和Orbitrap Fusion Lumos，能夠實現鑒定靈敏度及動態(tài)范圍的進一步提高。那么如何進行合理的實驗設計？質譜方法的參數設置？鑒定結果可做到什么程度？這些問題都會在以上報告中給出答案，精彩不要錯過！
文末福利：
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