菌落計數器由計數器、探筆、計數池等部分組成,計數器采用CMOS集成電路精心設計,LED數碼管顯示,字高13mm,清晰明亮,配合探筆,計數靈敏,菌落對比清楚。便于觀察??捎糜谑称?、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標本中細菌數的檢驗。那么菌落計數器都是怎樣進行計數的呢?下面介紹下菌落計數器的計數方法。
1.計數器測定法
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀察計數。由于計數室的容積是一定的(O.1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行,可立即得出結果(本法不僅適于細菌計數,也適用于酵母菌及霉菌孢子計數)。
2.電子計數器計數法
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個細胞,當一個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈沖,自動記錄在電子記錄裝置上。該法測定結果較,但它只識別顆粒大小,而不能區(qū)分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3.活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進行平板,根據培養(yǎng)出的菌落數,可算出培養(yǎng)物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數的方法,也是目前上許多國家所采用的方法。使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養(yǎng)基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。應用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是常用的活菌計數法。
4.比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。
5.測定細胞重量法
此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經離心后將濕菌體進行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6.測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩(wěn)定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適于細胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法(colour change unit,簡稱CCU)
這種方法通常用于很小,用一般的比濁法無法計數的微生物,比如支原體等,因為支原體的液體培養(yǎng)物是透明的,呈現(xiàn)為清亮透明紅色,因此無法用比濁法來計數,由于支原體固體培養(yǎng)很困難,用cfu法也不容易計數,因此需要用特殊的計數方法,即CCU法。它是以微生物在培養(yǎng)基中的代謝活力為指標,來計數微生物的相對含量的。
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