液相色譜等度梯度有什么不同

來源：液相色譜技術(shù) 2019年12月21日 16:28

新手學(xué)液相色譜，會碰到兩種洗脫方式：等度洗脫和梯度洗脫，什么情況下會用到等度，哪些條件下用梯度，有什么不同？

1、洗脫的改變與不改變的配比不同

等度洗脫：流動相的組成比例和流速恒定不變。

梯度洗脫：改變流動相的濃度配比。

2、它們的定義不同

等度洗脫定義：液相色譜操作中，等度洗脫即在樣品組分的分析周期中，流動相的組成比例和流速恒定不變的洗脫方式。與梯度洗脫對應(yīng)。

梯度洗脫定義：梯度洗脫又稱為梯度淋洗或程序洗脫。在同一個分析周期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。

用梯度洗脫還是等度洗脫，主要看雜質(zhì)的情況。同一物質(zhì)有梯度洗脫和等度洗脫兩種條件時，梯度洗脫的認(rèn)可度較高。雜質(zhì)與雜質(zhì)、主峰、溶劑峰的分離度一定要好（不好的話就要用梯度洗脫）。

1、雜質(zhì)和主成分極性相差很大，雜質(zhì)一定要全部都能洗脫出來（有時等度情況下沖兩三個小時雜質(zhì)也沖出不來，就必須考慮用梯度）。

2、雜質(zhì)和主成分極性相差較大，雜質(zhì)出峰太晚（等度沖兩個小時出來個雜質(zhì)，就可以通過梯度縮短檢樣時間）

3、還有就是雜質(zhì)極性比主峰的大，等度時要想主峰時間合適雜質(zhì)全堆在前邊，雜質(zhì)分開主峰又出峰太晚，這種情況也得考慮梯度洗脫。

在能達(dá)到較好的分離度的情況下能用等度就用等度，用梯度要麻煩一些。

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