小鼠ELISA試劑盒操作注意:
1.不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用小鼠ELISA試劑盒說明書嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
2.若不同批號小鼠ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3.反應(yīng)時間的誤差,做大量標(biāo)本時,一孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
4.臨界值附近標(biāo)本波動為正常現(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5.加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對閾值附近的標(biāo)本影響,建議校對加樣器。
小鼠ELISA試劑盒注意事項:
在收集標(biāo)本前必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成分是否足夠穩(wěn)定,我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測,對收集后當(dāng)天就進行檢測的標(biāo)本,請及時儲存在4℃的條件下備用,如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本,請在造模取材后,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保持。因冰室與室溫存在一定的溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質(zhì)量,所以請避免反復(fù)凍融。有代測需求的客戶,取材前請務(wù)必和我司銷售人員索要說明書,具體操作事項請與我司技術(shù)人員保持溝通。
液體類標(biāo)本:
包括血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清液等。
血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中如有沉淀,請再次離心。
血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或者肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,在離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
尿液:
用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并釋放細(xì)胞內(nèi)的成份,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量,加入一定量的PBS(PH7.4),用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?,?biāo)本融化后仍保持2-8℃的溫度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,分裝后留一份待檢測,其余冷凍備用。
小鼠ELISA試劑盒優(yōu)勢特點:
(1)、*試劑——性、靈敏性、特異性。
(2)、規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高。
(3)、先進的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強。
(4)、適用范圍——適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
(5)、可檢測指標(biāo)齊全——生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等。
(6)、節(jié)省實驗經(jīng)費。
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