細胞生物學實驗的日常,都是跟細胞培養(yǎng)、凍存和復蘇這些基本的操作密不可分的。在細胞凍存和復蘇領域一直奉行著一條黃金法則,那就是“慢凍快融”!實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。
慢凍
細胞是很脆弱的,尤其是哺乳動物細胞,只有一層薄薄的細胞膜,沒有堅固的細胞壁保護,在進入凍存狀態(tài)前,緩慢的降溫過程有助于保存細胞的活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜(DMSO)作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。
快融
細胞復蘇,是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養(yǎng),細胞恢復生長的過程。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成的損傷。
最常見的復蘇工具
水作為一種使用廣泛的導熱介質(zhì),具有良好的導熱性,可以保證快速加熱,同時也可防止凍存管內(nèi)部的局部過熱。水浴是細胞培養(yǎng)實驗室的標準配置之一,在進行細胞復蘇實驗時,無需額外的輔助設備或試劑。然,水浴經(jīng)常是作為實驗室共享的設備,若無專人值守,則水浴槽內(nèi)的水不會定期進行更換,就會攜帶污染,會間接導致復蘇細胞的污染風險。復蘇過程,常伴隨著對凍存管的晃動(晃動可以防止管內(nèi)樣品產(chǎn)生溫度差異),管蓋處也有滲入水的可能。
復蘇細胞新方案
Matrix 恒溫混勻儀
GET WHAT YOU WANT
為得到細胞培養(yǎng)實驗的一致結(jié)果,就要保證細胞復蘇的可重復性效果,就必須確保每次復蘇的條件一致(包括溫度、振動幅度、細胞活力等)。在這樣的需求背景下,誕生了諸多用于此應用的機器。Matrix 恒溫混勻儀,選配專門的凍存管適配加熱模塊,即可實現(xiàn)高效、可重復性的細胞復蘇結(jié)果!
顏值在線
Matrix Orbital Delta Plus高低溫混勻儀,搭配Cryo attachment(24 位凍存管配件,兼容1.5-2.0ml凍存管),可同時對多達24個凍存管進行細胞復蘇操作,適用于多種細胞類型,且具有與傳統(tǒng)方法(如水?。┑韧膹吞K效率。儀器自帶編程功能,用戶可進行個性化編輯,預存儲特定細胞的復蘇溫度、混勻速度、反應時間等參數(shù),利于不同細胞處理時的程序調(diào)用,方便快速。
為防止冷凝,確保體系內(nèi)的試劑樣本無損失,高溫反應時還可以選配熱蓋:
才華擔當
具備模塊自檢功能,根據(jù)模塊自動限定最大運行速度,多達13 種模塊可按需選配。
溫度范圍:RT-15°C 至 100°C
轉(zhuǎn)速范圍:0 / 300(可調(diào)節(jié)最小轉(zhuǎn)速) – 3,000 rpm(由模塊決定)
程序控溫:包括Ramp模式,即斜率控溫,允許自動執(zhí)行混合、加熱和冷卻任務
加熱速率:6°C/分鐘
冷卻速率: 2.5°C/分鐘
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