高效液相色譜儀是一種用于化學(xué)、生物學(xué)、化學(xué)工程領(lǐng)域的分析儀器,也是色譜法中一個重要的儀器,以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。高效液相色譜儀應(yīng)用很廣泛,基本能對有機(jī)化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進(jìn)行分離與檢測。目前,高效液相色譜儀已成為大多數(shù)化學(xué)行業(yè)和生命科學(xué)行業(yè)中的標(biāo)準(zhǔn)配置,如藥物研制和生產(chǎn)、蛋白質(zhì)、食品安全、環(huán)境、國土安全和石油化工等市場。
高效液相色譜儀一般由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關(guān)鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機(jī)、自動進(jìn)樣器、預(yù)柱或保護(hù)柱、柱溫控制器等。
工作流程如下:儲液器中的流動相被高壓泵打入檢測系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的“吸附-解吸”的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣本濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式輸出檢測結(jié)果。
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