看完這篇,檢測(cè)機(jī)構(gòu)的高效核酸提取你也會(huì)!
核酸在這幾年似乎變成了熱點(diǎn)詞匯,隨著疫情相關(guān)信息的傳播,許多先前不為大眾所知的診斷行業(yè)專業(yè)名詞逐漸為大家所知,如核酸檢測(cè)、試劑盒、咽拭子、假陰性等等。但實(shí)際上,核酸并不是疫情下產(chǎn)生的新名詞。
圖1:大眾認(rèn)知的核酸檢測(cè)
核酸提取通常是開啟生物學(xué)研究的首步,而且提取的核酸質(zhì)量高低也是決定下游實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵因素之一。無(wú)論后續(xù)的檢測(cè)、克隆、PCR、QPCR、建庫(kù)測(cè)序等等都需要核酸才能順利進(jìn)行。今天我們就來(lái)簡(jiǎn)單了解核酸提取的基本原理和方法。
1、核酸提取法種類有哪些?
現(xiàn)在常用的核酸提取法為離心柱純法和磁珠法等,但離心柱純化法效率低,步驟繁瑣。而由于檢測(cè)機(jī)構(gòu)每天需要處理大量樣本,大都是采用自動(dòng)化核酸提取儀配套磁珠法核酸提取試劑盒的方式進(jìn)行核酸提取步驟。
2、更效率的核酸檢測(cè)法——磁珠法
磁珠法——通過(guò)裂解液裂解細(xì)胞組織樣本,從樣本中游離出來(lái)的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附攜帶核酸的磁珠移動(dòng)至不同的試劑槽內(nèi),通過(guò)反復(fù)快速攪拌、混勻液體,經(jīng)過(guò)細(xì)胞裂解、核酸吸附、洗滌與洗脫等步驟,終得到純凈的核酸。
圖2:磁珠法步驟
核酸純化的方法是影響所提取核酸質(zhì)量的重要因素,只有高質(zhì)量的核酸才能滿足下游的各種應(yīng)用。
3、磁珠法的有利工具——磁珠分離架
Bel-Art 磁珠分離架具備更良好的質(zhì)量
對(duì)于所有磁分離實(shí)驗(yàn),強(qiáng)大的分離架可以固定磁珠,以便親和配體(抗體,鏈霉親和素或核酸偶聯(lián)專用試劑)或在分析中添加或傾倒沖洗溶液。
圖3:磁珠分離架
Bel-Art 磁珠分離架具備可拆卸套筒,可提高液體傳輸效率!與競(jìng)爭(zhēng)品牌相比,它們提供了更加好的質(zhì)量和價(jià)值。
4、磁珠分離架 型號(hào)與特點(diǎn)
1、 50ml和15/5ml型號(hào)的獨(dú)立套筒使液體添加和移除更容易,液體意外損失更少;
2、 強(qiáng)大的磁鐵可快速固定磁珠;
3、 50ml和15/5ml這兩種型號(hào)的套筒上有彈簧柱塞允許磁珠在管壁的不同高度被收集;
4、 只需轉(zhuǎn)動(dòng)管即可實(shí)現(xiàn)高效的珠?;旌希?/span>
5、 96孔PCR板型號(hào)有24個(gè)磁鐵,在管壁上吸住磁珠的同時(shí)緊緊地固定PCR板;
6、 標(biāo)準(zhǔn)尺寸平板型號(hào)全部覆蓋上了磁鐵,以接受所有標(biāo)準(zhǔn)尺寸的微板,不管它有多少孔;比如6孔,12孔,24孔,48孔,96孔的平板等;
7、 磁力架適合符合ANSI標(biāo)準(zhǔn)*的微孔板;
8、 透明的亞克力材質(zhì)便于觀察試管的內(nèi)容物。
*ANSI標(biāo)準(zhǔn):ANSI SLAS 4-2004(R2012)
5、磁珠分離架使用注意事項(xiàng)
1、該產(chǎn)品具有強(qiáng)大的磁性,使用時(shí)不要接近電子器材等磁記錄物品;
2、 清潔時(shí)避免使用酒精等溶劑,以防止亞克力塑料開裂。
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