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基于物質(zhì)對200～800nm光譜區(qū)輻射的吸收特性建立起來的分析測定方法稱為紫外-可見吸收光譜法或紫外-可見分光光度法。紫外可見光分光光度計(jì)工作原理與紅外光譜、拉曼光譜的工作原理近似，采用一定頻率的紫外可見光照射所需檢測的物質(zhì)，引起物質(zhì)中電子躍遷，從而表現(xiàn)出隨著吸收波長變化而引起的光譜變化，記錄光譜變化形成分析數(shù)據(jù)。
紫外可見光分光光度計(jì)可以分為以下幾種：
1、單光束UV：單光源發(fā)射單光束，全程密閉，通過光柵，照射樣品，最后由光電倍增管監(jiān)測器檢測。
2、比例雙光束UV：單光源單光束，全程密閉，通過光柵，加入棱鏡，把光分為兩束，分別照射樣品與空白，再合并光，進(jìn)入光電倍增管檢測器，通過差減法計(jì)算結(jié)果。
3、雙光束UV：單光源單光束，全程密閉，通過棱鏡分出兩道光，分別通過一光柵，分別進(jìn)入各自的光點(diǎn)倍增管檢測器。
4、全波段UV：單光源單光束，樣品與空白暴露在空氣中，照射樣品，開始進(jìn)入密閉箱，通過光柵，進(jìn)入DAD檢測器。
紫外可見光分光光度計(jì)可以分為以下幾種：
缺點(diǎn)：測完空白再測試樣品，全波段分析時間較長（一般2min）。
2、比例雙光束UV：單光源單光束，全程密閉，通過光柵，加入棱鏡，把光分為兩束，分別照射樣品與空白，再合并光，進(jìn)入光電倍增管檢測器，通過差減法計(jì)算結(jié)果。
好處：空白樣品同時檢測。
缺點(diǎn)：靈敏度下降，全波段分析時間較長。
3、雙光束UV：單光源單光束，全程密閉，通過棱鏡分出兩道光，分別通過一光柵，分別進(jìn)入各自的光點(diǎn)倍增管檢測器。
好處：加強(qiáng)靈敏度，同時測量空白與樣品。
缺點(diǎn)：全波段分析時間較長。
4、全波段UV：單光源單光束，樣品與空白暴露在空氣中，照射樣品，開始進(jìn)入密閉箱，通過光柵，進(jìn)入DAD檢測器。
好處：空白只需要檢測一次，如果你愿意一輩子檢測這一次都可以。檢測樣品不密閉，外界光線對其無影響，使用方便且精確。分析任何波段或全波段不到1s。
缺點(diǎn)：價格比較貴。
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