在抽血后1小時(shí)內(nèi)，使用細(xì)胞分離試劑盒富集患者來(lái)源的 CTCs。利用不同Marker對(duì)富集的CTCs進(jìn)行染色后，通過(guò)CellCelector Flex分離出單個(gè)細(xì)胞或 CTCs 簇，并將其放入含有裂解液的PCR管內(nèi)進(jìn)行下游分析。得益于CellCelector Flex在挑取和接種細(xì)胞過(guò)程中對(duì)細(xì)胞無(wú)損傷，這些細(xì)胞還可以被嫁接到小鼠體內(nèi)，用于建立腫瘤模型。

文章對(duì)CTCs進(jìn)行了分類，將其分為三種：?jiǎn)蝹€(gè)CTC（Single CTC）,CTC簇（CTC Clusters），以及CTC-白細(xì)胞簇(CTC-WBC)，而CTC-白細(xì)胞簇的轉(zhuǎn)移能力和殺傷更大。

通過(guò)CellCelector Flex挑取三種循環(huán)腫瘤細(xì)胞，并將其移植到小鼠體內(nèi)。研究表明，夜間睡眠期間產(chǎn)生的乳腺癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞很容易轉(zhuǎn)移，而白天活動(dòng)期間產(chǎn)生的循環(huán)腫瘤細(xì)胞則缺乏轉(zhuǎn)移能力。

研究團(tuán)隊(duì)對(duì)這些循環(huán)腫瘤細(xì)胞用CellCelector Flex進(jìn)行挑取后，對(duì)它們進(jìn)行了單細(xì)胞RNA測(cè)序分析。結(jié)果顯示，有絲分裂相關(guān)基因在夜間睡眠期間的CTCs中顯著上調(diào)，與白天CTCs相比，在夜間脫離腫瘤的循環(huán)腫瘤細(xì)胞分裂得更快，因此更可能形成腫瘤轉(zhuǎn)移。

目前用于研究腫瘤早期擴(kuò)散的小鼠異種移植模型存在局限性，因此需要另一種動(dòng)物模型進(jìn)行替代。斑馬魚(yú)已成為研究人類疾病包括癌癥轉(zhuǎn)移的寶貴工具。最近發(fā)表在《Cancers》上的一篇文章中提出了一種新的工作流程，將CTCs注入斑馬魚(yú)胚胎，為研究CTCs在斑馬魚(yú)中的轉(zhuǎn)移潛能提供了一個(gè)重要的模型。文章中利用CellCelector Flex不同孔徑的毛細(xì)管技術(shù)和精密的機(jī)械臂轉(zhuǎn)移技術(shù)成功將挑取到的CTCs注射到斑馬魚(yú)中，并測(cè)試了細(xì)胞在斑馬魚(yú)胚胎中的分布和存活情況。

將EGFP標(biāo)記的MDA-MB-231細(xì)胞注射到斑馬魚(yú)胚胎中。注射的細(xì)胞分散到斑馬魚(yú)胚胎的各個(gè)區(qū)域，包括頭部、軀干和尾巴。在 1 dpi（注射天數(shù)）時(shí)，平均有38.6±14.8個(gè)細(xì)胞播散到頭部區(qū)域，30±15.5個(gè)細(xì)胞播散到軀干區(qū)域，123 ±31.4個(gè)細(xì)胞播散到尾部區(qū)域，尾部擴(kuò)散的CTCs最多，這可能和尾部是血液形成部位有關(guān)。然而，在3dpi時(shí)，只有30±20.5個(gè)細(xì)胞位于頭部，16.3±10.2個(gè)細(xì)胞位于軀干，46.3±19.5個(gè)細(xì)胞位于尾部。這表明大約 50% 的注射細(xì)胞在1 到3dpi之間死亡并消失，與頭部區(qū)域相比，軀干和尾部區(qū)域丟失的細(xì)胞更多。

文章還用CellCelector Flex將轉(zhuǎn)移乳腺癌（MBC）患者體內(nèi)分離出的CTCs注射到斑馬魚(yú)胚胎中，在不同部位中進(jìn)行同樣的統(tǒng)計(jì)。

Cellcelector Flex配備了多種規(guī)格的玻璃毛細(xì)管，結(jié)合高精度的分離機(jī)器臂位移技術(shù)，可以輕松實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞和細(xì)胞團(tuán)的挑取和注射。目前，已經(jīng)有幾十篇文章應(yīng)用了Cellcelector Flex挑取CTCs。挑取和接種稀有細(xì)胞，怎能不愛(ài)CellCelector Flex？

-參考文獻(xiàn)-

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[2] DanioCTC: Analysis of Circulating Tumor Cells from Metastatic Breast Cancer Patients in Zebrafish Xenografts. Cancers,2023