手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
間充質(zhì)干細胞微載體/片狀載體培養(yǎng)細胞計數(shù)解決方案
間充質(zhì)干細胞(Mesenchymal Stem Cells，MSC)是一類多能干細胞，能夠分化為多種細胞類型，有很強的自我更新能力，具有免疫調(diào)節(jié)功能，且能分泌多種生物活性因子促進組織修復和再生。因此，MSC在再生醫(yī)學、組織工程、免疫調(diào)節(jié)、藥物篩選等方面有著廣泛的應用潛力。
MSC屬于貼壁依賴的細胞，通常需要附著在培養(yǎng)表面才能保持干性以及有效增殖和生長。為了進一步發(fā)揮MSC的功能，通常會利用微載體或者片狀載體進行大規(guī)模培養(yǎng)。在MSC的微載體/片狀載體培養(yǎng)過程中，常規(guī)使用的是胰酶消化后的細胞懸液進行細胞計數(shù)，觀察MSC細胞濃度變化和活率變化，但也面臨一些問題：
胰酶消化微載體上的細胞，往往不能消化；
胰酶過度消化也容易造成細胞損傷，活性下降。
艾貝泰Countleader®雙熒光細胞計數(shù)儀，搭配艾貝泰自產(chǎn)細胞裂解液A+B液，可很好的解決胰酶消化操作復雜、結(jié)果準確性低的問題。
MSC微載體培養(yǎng)計數(shù)方法
首先將培養(yǎng)的MSC樣本分為兩份：
一份樣本中按等體積加入Reagent A100 裂解緩沖液處理微載體懸浮培養(yǎng)物，裂解緩沖液使細胞質(zhì)膜通透并從微載體上釋放細胞核。然后用等體積的Reagent B穩(wěn)定細胞核，形成穩(wěn)定的細胞核懸液(樣品1)，取樣品1與AOPI染料1:1 混合，吸取15μL 染色后的細胞樣品加入到FL8-slides耗材的待測通道中(通道1)。
另外一份樣本(樣品2)同時與AOPI染料1:1 混合， 吸取15μL染色后的細胞樣品加入到FL8-slides耗材的待測通道中(通道2)。
Countleader® FL 1000細胞計數(shù)儀內(nèi)置“Viability and Cell Count Assay A100 And B”分析方法。通道1獲得總細胞濃度，通道2獲得死細胞濃度。
|
|
PI能夠與死細胞、細胞裂解后的細胞核染色，呈現(xiàn)紅色熒光。無需手動計算，設備軟件自行運算，直接快速、準確的獲得微載體培養(yǎng)MSC的活細胞濃度以及活率。
|
|
| 通道1：總細胞核圖像 | 通道2：死細胞核圖像 |
MSC片狀載體培養(yǎng)計數(shù)方法
收集2-3個片狀載體至50 mL離心管中，加入適量體積(淹沒整個片狀載體為準)的Reagent A100 裂解緩沖液，裂解10 min(按照不同載體材質(zhì)，裂解時間可分別設置5 min、10 min、15 min、20 min等，如果延長時間后，細胞數(shù)量沒有顯著增加，可以確定最佳孵育時間)，加入等體積的Reagent B 穩(wěn)定細胞核，混合均勻。
取裂解完畢后的混合液與AOPI染料1:1 混合,吸取15μL 染色后的細胞樣品加入到FL8-slides耗材的待測通道中。Countleader® FL 1000細胞計數(shù)儀內(nèi)置“Viability and Cell Count Assay (AOPI)”分析方法，設置樣本名稱、視野面積以及稀釋倍數(shù)。PI能夠與細胞裂解后的細胞核染色，呈現(xiàn)紅色熒光。
·裂解后細胞核圖片·
細胞計數(shù)結(jié)果：片載體細胞濃度（cells/cm2）=
注：艾貝泰提供的Reagent A100和Reagent B也可用于結(jié)團細胞的裂解計數(shù)，精確獲得結(jié)團細胞的計數(shù)結(jié)果。
Countleader® FL 1000細胞計數(shù)儀，具備臺盼藍、AOPI雙熒光雙分析模式，8通道耗材，操作簡單，重復性好，符合FDA的21 CFR Part11的要求！
|
|
Countleader® 系列細胞計數(shù)儀，可以滿足您的不同需求！
· 關于艾貝泰 ·
艾貝泰生物科技有限公司(Applitech Biological Technology Co., Ltd.)作為一家集設計、研發(fā)、生產(chǎn)、銷售和服務于一體的高新技術(shù)企業(yè)，致力于為生物制藥領域提供專業(yè)的生產(chǎn)及分析設備、一次性耗材和整體解決方案。從成立至今，我們始終以客戶為中心，將“質(zhì)量為本，服務為先”作為經(jīng)營方針，立足于生物工藝的優(yōu)化、放大和生產(chǎn)，不斷完善生物制藥領域的產(chǎn)品線，為用戶提供生物工藝的專業(yè)解決方案，助力用戶在生物制藥領域不斷取得新的突破。
艾貝泰深耕生物反應器領域?qū)⒔?0年，立志打造自主生物反應器。我們的生物反應器覆蓋從研發(fā)、中試以及cGMP生產(chǎn)多 領域，廣泛應用于抗體、疫苗、細胞治療、基因治療以及干細胞治療等領域的研發(fā)及生產(chǎn)。以生物反應器為業(yè)務核心，我們逐步形成涵蓋過程檢測、光譜分析、細胞分析、在線取樣、樣品處理等的產(chǎn)品布局，為國內(nèi)外生物制藥企業(yè)提供了廣泛的產(chǎn)品與技術(shù)服務。
艾貝泰的銷售及售后服務網(wǎng)絡遍布全國，總部位于廣州，在上海、北京設立分公司及產(chǎn)品展示及應用中心，在成都、西安等地設立辦事處，在天津、蘇州、杭州、武漢、南京、蘭州、長春、青島等地設置服務點。艾貝泰秉承“技術(shù)專業(yè)、服務周到、行動快速”的服務宗旨，以客戶為導向，與技術(shù)伙伴緊密合作，共同為生物制藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展保駕護航！
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關權(quán)利。
采購中心